CARACTERIZACIÓN DE LA RESPUESTA INMUNE ADAPTATIVA TEMPRANA INDUCIDA EN BOVINOS POR INFECCIÓN EXPERIMENTAL CON EL VIRUS DE LA FIEBRE AFTOSA MEDIANTE UN MODELO DE AEROSOL CONTROLADO

PEGA, JUAN FRANCO; BUCAFUSCO, DANILO; DI GIACOMO, SEBASTIÁN; STAFFORINI, GUILLERMINA; PÉREZ, CLAUDIA; MARADEI, EDUARDO; RODRÍGUEZ, LUIS; BORCA, MANUEL VÍCTOR; PÉREZ FILGUEIRA, MARIANO

Villa Giardino, Córdoba

Jornada; XXX Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Virología (SAV); 2010

Asociación Argentina de Microbiología (AAM)

Los anticuerpos neutralizantes inducidos en el bovino luego de la infección con el virus de la Fiebre Aftosa (VFA) son fundamentales para la eliminación del virus, y los niveles de los mismos en la región orofaríngea y en plasma se correlacionan con protección frente a posteriores reinfecciones. El entendimiento de los mecanismos inmunológicos responsables de la resolución de la enfermedad es de gran relevancia para el desarrollo de estrategias profilácticas.El objetivo de este trabajo es dilucidar el armado de la respuesta inmune adaptativa inducida en el bovino, durante los eventos que tienen lugar tempranamente luego de la infección por VFA. Se infectaron 13 bovinos Hereford (aprox. 300 kg) seronegativos para el VFA, provenientes de la zona libre de Fiebre Aftosa sin vacunación (Patagonia Argentina). Para ello, los animales fueron alojados en boxes con nivel de contención biológica BSL-3A del CICVyA-INTA, donde se efectuaron las inoculaciones experimentales. Las descargas se efectuaron con 2 ml por animal de VFA activo del serotipo O1Campos (10*7 BTID50/ml) mediante nebulización, a fin de recrear las condiciones de una infección natural por vía oronasal. Diariamente se tomaron muestras de suero de todos los bovinos desde el desafío viral hasta su eutanasia. Los animales fueron sacrificados entre los 2 y 6 días post-infección (dpi), y en cada uno de ellos se extrajeron post-mortem tejidos linfoides de mucosas del tracto respiratorio con el objeto de detectar células secretoras de anticuerpos (ASC) específicas para el VFA, empleando un ELISPOT para isotipos (IgA, IgM, IgG1 e IgG2) desarrollado en nuestro laboratorio. Las estructuras anatómicas analizadas comprendieron: linfonódulos mandibulares, linfonódulos retrofaríngeos mediales y laterales, tonsila faríngea, linfonódulo traqueobronquial y bazo. Los anticuerpos séricos contra el virus fueron determinados por medio de un ELISA de bloqueo en fase líquida (lpELISA), y la capacidad neutralizante de los mismos fue evaluada mediante un ensayo de seroneutralización viral (VNT). A partir del 4to dpi se detectaron ASC a nivel local en tejidos linfoides de mucosas, cuyo número se hizo máximo al 6to dpi, mientras que la seroconversión medida por lpELISA ocurrió entre el 4to y 5to dpi, coincidiendo con la dinámica observada mediante VNT y con la manifestación de signos clínicos típicos de Fiebre Aftosa. La presencia de todos los isotipos en todos los tejidos evaluados indica una fuerte respuesta de mucosas, relacionada con la replicación primaria del virus en el tracto respiratorio.Fue posible detectar respuestas específicas contra el VFA en el tracto respiratorio de animales infectados a partir de los 4 dpi. Los linfonódulos traqueobronquiales mostraron la mayor reactividad entre los 4 y 5 dpi, seguidos por los mandibulares y retrofaringeos. Los perfiles isotípicos correspondieron con una respuesta primaria (IgM>IgG1>IgA>IgG2). A los 6 dpi, más del 0,2% de las células mononucleares totales aisladas producian anticuerpos anti-VFA. Se observó un breve lapso temporal entre la inducción de inmunidad local en mucosas y la aparición de respuestas sistémicas.