EL ANTI-ONCOGEN P21 ES UN REGULADOR NEGATIVO DE LA EXPRESIÓN DE MICA

LUCAS EZEQUIEL ROSSI; CAROLINA INES DOMAICA; MERCEDES BEATRIZ FUERTES; MARÍA VICTORIA GIRART; DAMIAN EZEQUIEL AVILA; GABRIEL ADRIAN RABINOVICH; NORBERTO WALTER ZWIRNER

La Falda, Cordoba

Congreso; LVI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2008

Sociedad Argentina de Inmunología

Diversas células tumorales expresan ligandos del receptor NKG2D, lo que dispara la citotoxicidad y secreción de IFN-g de células NK, linfocitos T gd y ab CD8+. Entre ellos se destaca MICA, cuya expresión está regulada por estímulos de daño al DNA (DNA damage pathway). Tal respuesta involucra la activación de señales que activan a los anti-oncogenes p53 y p21. Previamente, hemos demostrado que p53 (que se encuentra mutado en muchos tumores) no participa en la regulación de la expresión de MICA. Por otro lado, p21 actúa como regulador del ciclo celular y puede ser activado por determinados estímulos oncogénicos en forma dependiente o independiente de p53 (en este caso dependiente de p63 y/o p73, entre otros). Hasta la fecha, se han publicado numerosos trabajos sobre la función de estos genes durante la progresión tumoral y control del ciclo celular. Sin embargo, existe escasa evidencia acerca del efecto de p21 en la regulación de moléculas de importancia en la interfase tumor-sistema inmune. Objetivo: investigar si la molécula p21 regula la expresión de MICA en células tumorales. Para esto, nos planteamos dos estrategias experimentales: 1) comparación de la expresión de MICA en células del adenocarcinoma humano de colon HCT116 con p21 salvaje (wild type o wt) con células HCT116 knock-out para p21 (p21-/-). Se analizó la expresión de MICA por citometría de flujo y western blot; 2) sobre-expresión de p21 en el carcinoma humano de pulmón NCI-H1299, transfectado establemente con un sistema de promotor inducible por Ponasterona A. Se analizó la expresión de MICA por citometría de flujo. Observamos una mayor expresión de MICA por citometría de flujo en células HCT116 p21-/- (SFI=3,969±0,18) que en células HCT116 wt (SFI=2,786±0,08; p=0,0251). Estos resultados fueron corroborados por western blot. Asimismo, observamos una disminución en la expresión de MICA en superficie celular en forma dependiente de los niveles de p21 y del tiempo, en el sistema inducible (expresión relativa al basal: 0,736±0,08 a 24 hs post inducción; 0,693±0,095 a 48 hs post inducción, p menor 0,05; 0,598±0,160 a 72 hs post inducción, p menor 0,05). Estos resultados indican que el anti-oncogen p21 es un regulador negativo de la expresión de MICA. Por lo tanto, el silenciamiento de p21 generalmente observado en muchos tumores, además de prevenir la interrupción del ciclo celular tendría consecuencias sobre la expresión de ligandos activadores de células NK y posiblemente sobre la inmunidad anti-tumoral.