Regulación de degranulación y secreción de IFN-gamma; en células NK por linfocitos T activados que han experimentado contacto con células tumorales a través de la captura de ligandos de NKG2D y NKp46.

CAROLINA INES DOMAICA; MERCEDES BEATRIZ FUERTES; LUCAS EZEQUIEL ROSSI; MARÍA VICTORIA GIRART; DAMIAN EZEQUIEL AVILA; GABRIEL ADRIAN RABINOVICH; NORBERTO WALTER ZWIRNER

La Falda, Cordoba

Congreso; LVI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2008

Sociedad Argentina de Inmunología

NKG2D es un receptor de células NK y linfocitos T (LT) gd y ab CD8+ que induce citotoxicidad y secreción de IFN-g. Sus ligandos (NKG2DL) son las proteínas de membrana MICA/B y las moléculas ancladas a GPI ULBP-1, -2 y -3 y se sobre-expresan en células tumorales. Previamente demostramos que luego del co-cultivo, LT activados (LTa) capturan MICA (pero no ULBPs) de la superficie de células de melanomas humanos que expresan este NKG2DL. Empleando células marcadas con CFSE o DiOC18 observamos que el fenómeno comprende además la transferencia de otras moléculas de superficie de células tumorales a la superficie de LTa en forma dependiente del contacto celular. Con el objeto de investigar el impacto de esta captura de moléculas (ahora presentes en superficie de LTa) sobre las células NK, en este trabajo investigamos la regulación de las funciones efectoras de células NK luego del co-cultivo con LTa que experimentaron un contacto previo con células tumorales. Observamos que sólo un clon del melanoma IIB-MEL-LES que sobre-expresa MICA en superficie (clon 1) pero no un clon que no expresa MICA en superficie (clon C) ni LTa que capturaron MICA, fue susceptible a la lisis por células NK. Asimismo, LTa vírgenes de contacto con células tumorales promovieron la aparición de un 4,0±0,3% de células CD3-CD56+CD107a+, mientras que LTa que experimentaron contacto previo con el clon C o el clon 1 promovieron la aparición de un 12,9±0,4% (p menor 0,01) y 9,1±1,1% (p menor 0,05) de células CD3-CD56+CD107a+, respectivamente, indicando que estos LTa promueven la degranulación de las células NK siendo resistentes a la citotoxicidad. Asimismo, células NK de 14 donantes secretaron más IFN-g cuando fueron co-cultivadas con LTa que habían estado previamente en contacto con el clon 1 (4091±1116 pg/ml; p menor 0,01) o el clon C, (4720±1317 pg/ml; p menor 0,001) en comparación a células NK que fueron co-cultivadas con LTa vírgenes de contacto con células tumorales (332±146 pg/ml). Mediante ensayos de bloqueo con AcMo, observamos una dependencia de NKG2D (p menor 0,01) y NKp46 (p menor 0,01) pero no de NKp30 ni NKp44 en la secreción de IFNg en este sistema experimental. Por lo tanto, LTa capturan NKG2DLs y NKp46Ls de células tumorales y promueven la degranulación y secreción de IFNg por células NK. Consecuentemente, células de la inmunidad adaptativa colaborarían con células de la inmunidad innata de manera independiente del TCR, lo que indicaría una nueva función de los LT en el desarrollo de la respuesta anti-tumoral.