DESARROLLO DE MARCADORES ESPECÍFICOS ASOCIADOS A ANDROESTERILIDAD GENICA EN Cynara Cardunculus L.

ZAYAS, ALDANA; ACQUADRO, ALBERTO; MARTIN, EUGENIA ; PORTIS, EZIO; COMINO, CINZIA; CRAVERO, VANINA

Congreso; IV Reunión Conjunta de Sociedades de Biología de la República Argentina; 2020

Sociedades de Biología de la República Argentina

La especie Cynara cardunculus L. (Asteracea), incluye tres variedades botánicas completamente interfértiles: var. scolymus (alcachofa o alcaucil), var. altilis (cardo cultivado) y var. sylvestris (cardo silvestre); siendo el alcaucil el de mayor importancia económica principalmente por la comercialización de sus inflorescencias (capítulos) frescos o procesados. Al tratarse de una especie alógama, cuya inflorescencia está formada por un gran número de flores completas o bisexuales, la castración manual resulta extremadamente dificultosa, por tanto, es indispensable contar con un sistema de androesterilidad. Dicho carácter sólo se reportó en alcaucil como androesterilidad del tipo nuclear o génica. Con el objetivo de desarrollar marcadores moleculares específicos asociados a la androesterilidad génica en la especie se evaluaron las secuencias génicas de marcadores moleculares SRAP (Sequence Related Amplified Polymorphism) previamente desarrollados por el grupo de trabajo. Como material de trabajo se utilizó una población segregante para el carácter originada por el cruzamiento entre un genotipo de alcaucil androestéril (progenitor femenino) y un genotipo de cardo cultivado (progenitor masculino). La población y ambos progenitores fueron previamente evaluadas fenotípicamente, lo que permitió clasificar las plantas de la población de acuerdo a su producción de polen en dos grupos: fértiles (PF) y androestériles (MS) y determinar una segregación 3:1 correspondiente a un único locus que en estado homocigota recesivo genera el fenotipo androestéril. Posteriormente, 15 plantas de cada uno de los grupos y ambos progenitores fueron evaluados con marcadores SRAP en combinación con la estrategia BSA (Bulked Segregant Analysis) y se identificaron dos marcadores flanqueantes al locus ms a una distancia de 0,5 y 4,3 cM, denominados SRAP 7-10.1774 y SRAP 4-9.600 respectivamente. Con estos resultados previos se procedió al clonado mediante el vector pGEM®-T Easy (Promega) y posterior secuenciación de 500ng de ADN de cada marcador en BMR Genomics (Italia). Análisis bioinformáticos permitieron determinar que SRAP 7-10.1774 presenta homología con un gen que contiene un dominio CHORD cuya proteína codificada es de función desconocida; mientras que SRAP 4-9.332 presenta homología con una poligalacturonasa, en la que fue identificada una mutación puntal causante de androesterilidad en tomate. A partir de las secuencias de ambos marcadores se diseñaron cinco pares de cebadores específicos con el programa Primer3, los cuales fueron evaluados en ambos progenitores para determinar si efectivamente mostraban bandeo diferencial entre plantas fértiles y androestériles. Como resultado de dicha evaluación se identificó un único marcador con bandeo diferencial, el cual podría constituir una herramienta sumamente útil en la aplicación de selección de asistida (MAS) en los programa de mejoramiento de la especie tendientes al desarrollo de materiales híbridos mediante la utilización de la androesterilidad en uno de los materiales parentales.