Lechos de Carragenano-Alginato como alternativa para la bioseparación de proteasas aspárticas

BÁRBARA BOSIO

Encarnación

Jornada; XXV Jornadas de Jóvenes Investigadores; 2017

Universidad Nacional de Itapúa

En nuestra provincia la industria frigorífica genera gran cantidad de residuos. Dentro de éstos encontramos el páncreas bovino, fuente de proteasas aspárticas con gran aplicación en diferentes procesos. El objetivo del presente trabajo fue la recuperación de la quimotripsina bovina a partir de dicho residuo. La metodología desarrollada se basa en la adsorción de la enzima sobre una matriz insoluble formada por dos polielectrolitos naturales: alginato y carragenano, entrecruzada covalentemente. En una primera instancia, se trabajó con la enzima comercial y, mediante la utilización de herramientas de diseño experimental, logró determinarse que la condición óptima para realizar la adsorción es trabajar a pH 6,50 en ausencia de sales agregadas al medio y que la temperatura no afecta la capacidad de adsorción al menos en el rango estudiado. En dichas condiciones la cinética de la adsorción sigue un modelo de pseudo-primer orden, alcanzando el equilibrio en 40 minutos bajo condiciones de saturación. La isoterma de adsorción, a 25 ºC, ajusta al modelo de Freundlich con una capacidad máxima de adsorción de 9,57 mg QT/g matriz. Se logró recuperar el 93,1% de la enzima adsorbida mediante la adición de 500 mM de NaCl al buffer de trabajo. Los resultados fueron aplicados a la purificación de la enzima a partir de una fuente natural, dando un factor de purificación de 4 y un rendimiento del 49%.