Extracción de ADN y determinación a nivel genérico de hongos micorrícico arbusculares (HMA) de suelos de la Puna argentina

M.S. RIVERO MEGA; COVACEVICH F.; M.A. LUGO; E.M. CRESPO

Mar del Plata

Encuentro; VIII BER (Biólogos en Red); 2013

VIII BER2013 FCEyN UNMdP

Los Glomeromycota o HMA son representantes del reino Fungi que se asocian simbióticamente formando micorrizas arbusculares en las raíces de las plantas. Los HMA contribuyen a la nutrición mineral de la mayoría de las plantas y a la conservación del suelo, por ello su conocimiento resulta de gran importancia. La determinación taxonómica de los HMA basada en la caracterización morfológica de sus esporas es controvertida, debido a que los caracteres son difíciles de observar para operadores poco entrenados y pueden variar con las propiedades fisico-químicas del suelo. Por lo tanto, resulta prometedora la aplicación en la taxonomía de los HMA de técnicas no-morfológicas, que permitan la rápida y eficaz identificación de géneros. El objetivo del trabajo fue caracterizar a nivel genérico los HMA nativos de la Puna argentina utilizando técnicas moleculares y comparar los resultados con los obtenidos previamente mediante técnicas morfológicas por el grupo de investigación. Se realizó la extracción de ADN (kit Power-Soil-DNA-Isolation) a partir de suelos rizosféricos puneños, mantenidos en cultivos denominados ?plantas trampa? (PT), y de esporas aisladas a partir de estas PT. Ambas extracciones se efectuaron utilizando el mismo kit de extracción; para esporas, se empleó una modificación (previamente implementada por el grupo de trabajo) macerándolas en el primer buffer de extracción del protocolo. El ADN extraído se utilizó como molde en reacciones de PCR empleando cebadores específicos para diferentes géneros de HMA. Se obtuvieron amplificaciones positivas para HMA de los géneros Funneliformis, Acaulospora, Gigaspora y Paraglomus, los que coinciden mayoritariamente con los géneros hallados previamente por métodos morfológicos. Además, se registra por primera vez el género Paraglomus en la Puna. Si bien sería recomendable la confirmación de los géneros mediante secuenciamiento, nuestros resultados sugieren que ambas técnicas serían complementarias para la determinación taxonómica de los HMA puneños.