Regulación de la producción de esteroides en células adrenocorticales humanas de la línea H295R mediada por el receptor OxeR1

NEUMAN, I.; DATTILO, M.; MUÑOZ, M.; MALOBERTI, P.; CORNEJO MACIEL, F.

Mar del Plata, Buenos Aires

Congreso; LIX Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2014

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

Previamente demostramos, con herramientas farmacológicas y de biología molecular, la participación del receptor de membrana OxeR1 en la regulación de la producción de esteroides en células de Leydig y adrenocorticales. El OxeR1 es un receptor de membrana acoplado a proteína G, mediador de las acciones del 5-oxo-ETE, 5-HETE y 5-HpETE, productos del metabolismo del ácido araquidónico a través de la 5-lipoxigenasa. En células esteroidogénicas, estos compuestos son necesarios para la inducción de la proteína StAR (Steroidogenic Acute Regulatory protein) y la activación de la esteroidogénesis. En el presente trabajo analizamos la funcionalidad del receptor de membrana en las células adrenocorticales humanas de la línea H295R como sistema esteroidogénico. Para ello, obtuvimos las líneas H295R-vacío y H295R-OxeR1, por transfección estable de un vector de expresión vacío o conteniendo el ADNc del OxeR1, respectivamente. En estas líneas se analizó la expresión del OxeR1 por RT-PCR, western blot e inmunocitoquímica, verificando mayores niveles de ARNm y proteína en las células H295R-OxeR1 comparadas con las H295R-vacío. La estimulación con 8Br-AMPc (5.10-4 M) y Angiotensina II (10-8 M) durante 6 h produjo un aumento significativo en la producción de progesterona (evaluada por radioinmunoensayo) (p