El paciente obtiene el diagnóstico de certeza de las especies genéticas del Complejo Burkholderia cepacia en un lapso de 4 días, resultado que solo puede obtenerse realizando tipificación por metodología molecular.

Como estos pacientes suelen estar infectados/colonizados por más de una especie bacteriana, simultáneamente en nuestro laboratorio se hace el diagnóstico de dos especies que producen infecciones crónicas en esta comunidad de pacientes, Pseudomonas aeruginosa y Staphylococcus aureus meticilino resistente.

A partir de 3 muestras de esputo o hisopado que se le solicitan al paciente, se realiza una Multiplex-PCR que permite diagnosticar la presencia i) de P. aeuginosa (Pae), ii) de las diferentes especies genéticas del Complejo Burkholderia cepacia (CBC) y iii) de Staphylococcus aureus resistente a la meticilina (SAMR), directamente a partir de la muestra de esputo de pacientes con FQ. Se realiza paralelamente tanto el cultivo a partir de cada esputo con la correspondiente identificación bioquímica, como el desarrollo por biología molecular. Para la detección molecular se usan los siguientes cebadores:i) para Pae se amplifican los genes de oprL, y eta; ii) para el CBC se amplifica y realiza posterior secuenciación del gen recA; iii) para SAMR se amplifica el gen mecA. Se realiza la extracción de ADN a todas las muestras a partir de esputo y a partir de aislamiento en placa por el método de fenol-cloroformo con el agregado de DMSO (dimethyl sulfoxide) que aumentó la especificidad del apareamiento de los primers en la PCR y eliminó el apareamiento erróneo de los primers. La concentración óptima de ClMg fue de 2.5mM y la temperatura óptima de annealing fue de 56ºC.

Ciencias Médicas

MEDICINA-BACTERIOLOGIA

Salud humana

Investigación y desarrollo experimental en el campo de las ciencias médicas

Fibrosis Quística
Complejo Burkholderia cepacia
Infecciones pulmonares
Pseudomonas aeruginosa
Staphylococcus aureus

Estudio de sensibilidad de drogas antifúngicas.

Método de difusión por disco: en medio de Müller Hinton suplementado con glucosa y azul de metileno se colocan discos de antifúngicos con concentración de antifúngicos estandares para cada uno de ellos (Fluconazol, Voriconazol, Itraconazol, posaconazol, anfotericina B y caspofungina).Se incuba por 24 hrs y se lee el diámetro del halo de inhibición. Método de Etest Igual metodología pero los antifúngicos están montados en tiras de papel en gradiente de concentración.

Ciencias Médicas

BIOLOGIA-MICROBIOLOGIA

Salud humana

Servicios de prácticas de diagnóstico en laboratorios (Incluye análisis clínicos, bioquímica, anatomía patológica, laboratorio hematológico, etc.)

micología
microbiología

Examen directo: observación microscópica al estado fresco y con tinciones.

Tinción con Giemsa, Ziehl Neelsen, Gram y Kinyoun. Cultivos en medios de agar Lactrimel y agar Sabouraud Tipificación de agentes fúngicos

Ciencias Médicas

BIOLOGIA-MICROBIOLOGIA

Salud humana

Servicios de prácticas de diagnóstico en laboratorios (Incluye análisis clínicos, bioquímica, anatomía patológica, laboratorio hematológico, etc.)

micología
microbiología
Micosis Profunda

Tipificación de diferentes agentes fúngicos a partir de cultivos de muestras clínicas

a) Hongos levaduriforemes: utilización de medios cromogénicos (CHROM agar). Micromorfología en medio de agar-leche. Pruebas bioquímicas por metodos manuales y comerciales (API ID 32C Biomerieux France) b) Hongos filamentosos: realización de colonias gigantes , microcultivos en medios especiales (sabouraud, lactrimel, agar papa, czapeck, infusión cerebro- corazón)

Ciencias Médicas

BIOLOGIA-MICROBIOLOGIA

Salud humana

Servicios de prácticas de diagnóstico en laboratorios (Incluye análisis clínicos, bioquímica, anatomía patológica, laboratorio hematológico, etc.)

micología
microbiología

Preparación de antígeno metabólico (exo-antígenoa) y citoplasmático. Cultivos en medios líquidos y sólidos y obtención de extractos específicos para Histoplasma capsulatum, Paracoccidioides brasiliensis, Coccidioides posadasi y Aspergillus spp.

Antígeno metabólico: Los hongos filamentosos son sembrados en medio líquido con 1% de extracto de levadura y 2% de glucosa por 7 días a 28 grados. Luego el micelio es separado por filtración y suspendido en una solución de merteolato de borato de sodio y fenilmetilsulfonilfluoruro. La suspensión se mantirene 5 días a 28, luego se separa el micelio y el líquido sobrenadante es liofilizado. El liofilizado se resuspende con agua destilada y su poder antigénico es probado con sueros testigos posistivos y negativos en medio de inmunodifusión . Antígeno citoplasmático Los hongos son sembrados en caldo glucosado al 2%, se incuban en agitador mecánico rotatorio por 7 días. Las células son separadas por centrifugación y resuspendidas en soluciones con merthiolato-borato de sodio y fenilmetilsulfonilfluoruro, se congelan y se rompen. Las paredes celulares son separadas por centrifugación. El sobrenadante es utilizado como antígeno. Su eficacia se prueba por inmunodifusión con sueros testigos positivos y negativos.

Ciencias Médicas

BIOLOGIA-MICROBIOLOGIA

Salud humana

Servicios de prácticas de diagnóstico en laboratorios (Incluye análisis clínicos, bioquímica, anatomía patológica, laboratorio hematológico, etc.)

micología
microbiología

Examen directo con hidróxido de potasio, coloraciones y cultivo de las muestras antes mencionadas

Observación microscópica de las muestras clínicas Cultivo en medios de agar Lactrimel y agar Sabouraud Tipificación de agentes fúngicos a partir de cultivos

Ciencias Médicas

BIOLOGIA-MICROBIOLOGIA

Salud humana

Servicios de prácticas de diagnóstico en laboratorios (Incluye análisis clínicos, bioquímica, anatomía patológica, laboratorio hematológico, etc.)

micología
microbiología

Búsqueda de hongos en sangre, en pacientes inmunosuprimidos

Se recogen de 2 a 3 muestras de sangre venosa en forma estéril. Se colocan 9 ml de la sangre en un tubo estéril con 1 ml de saponina al 5% y polianetol sulfato de sodio al 0,4 % o EDTA. Los tubos de lisis centrifugación se centrifugan durante 30 minutos y se descarta el sobrenadante. El sedimento se siembra en 4 tubos conteniendo medio de cutivo (Sabouraud y Latrimel). Los tubos se incuban a 28 grados y 37 grados por 3 a 4 semanas, al cabo de ese tiempo se observa el desarrollo fúngico. En caso de ser positivo se realiza la tipificación.

Ciencias Médicas

BIOLOGIA-MICROBIOLOGIA

Salud humana

Servicios de prácticas de diagnóstico en laboratorios (Incluye análisis clínicos, bioquímica, anatomía patológica, laboratorio hematológico, etc.)

micología
microbiología

Técnica de aglutinación con partículas de látex adsorbidas con anticuerpos monoclonales específicos contra la cápsula del hongo

Se utiliza equipo comercial IMMY (Myco IMMUN) para la detección de antígenos de la cápsula de Cryptococcus neoformans en suero, líquido cefalorraquídeo u orina.

Ciencias Médicas

BIOLOGIA-MICROBIOLOGIA

Salud humana

Servicios de prácticas de diagnóstico en laboratorios (Incluye análisis clínicos, bioquímica, anatomía patológica, laboratorio hematológico, etc.)

micología
microbiología

Ensayos inmunológicos para la detección de anticuerpos por I) Inmunodifusión II) Contrainmunoelectroforesis

Inmunodifusión: en una placa de Petri se coloca medio de agar noble, y se realizan cavidades de 6 mm, en una de ellas se coloca el antígeno y en la otra el suero en estudio. Se incuba 48 hrs y se lee, en caso de ser positiva se observa bandas de precipitación. Contrainmunoelectroforesis con inmunodifusión secundaria. Se utiliza como soporte portaobjeto con agarosa, se realizan orificios donde se colocan el suero en estudio y el antígeno. Se realiza una corrida electroforética por 1 hora.

Ciencias Médicas

BIOLOGIA-MICROBIOLOGIA

Salud humana

Servicios de prácticas de diagnóstico en laboratorios (Incluye análisis clínicos, bioquímica, anatomía patológica, laboratorio hematológico, etc.)

micología
microbiología

El servicio se ofrece tanto para fabricantes de desinfectantes que necesiten un certificado de eficacia para ser aprobado por la ANMAT y para hospitales que necesitan conocer la causa ante la presencia de un microorganismo multirresistente.

Se utiliza el método de dilución/neutralización siguiendo las normas AENOR, 1997; AFNOR, 1995. Se puede realizar el estudio con una cepa bacteriana frente a diferentes diluciones del desinfectante o ensayar un desinfectante frente a cinco cepas bacterianas más frecuentes en el ambiente hospitalario

Ciencias Médicas

MEDICINA-BACTERIOLOGIA

Sanidad ambiental

Servicios de prácticas de diagnóstico en laboratorios (Incluye análisis clínicos, bioquímica, anatomía patológica, laboratorio hematológico, etc.)

actividad bactericida
desinfectantes

Evaluación cualitativa y cuantitativa por tinción con un colorante vital. Evaluación biológica de los dispositivos médicos mediante pruebas de citotoxicidad in vitro.

Evaluación cualitativa de la citotoxicidad in vitro por estudio de la morfología y aspecto general de la monocapa celular mediante la observación al microscopio óptico. Evaluación cuantitativa por tinción con el colorante vital azul de tripano y cálculo del porcentaje de células viables.

Cabina de seguidad biológica clase II Sabella CSB-calseIIA-B3 | Microscopio óptico invertido Olympus CK2 | Estufa de cultivo Dalvo

Ciencias Médicas

MEDICINA-ESPECIALIDADES BIOMEDICAS

Salud humana

Ensayos y análisis técnicos

Citotoxicidad in vitro
ISO 10993-5: 2009

Evaluación cuantitativa de la actividad antiviral del interferón pegilado frente a diversos sistemas de replicación in vitro del HCV.

Se utilizan 3 líneas celulares. a) Línea celular conteniendo un replicón con genes estructurales y no estructurales (FL). b) Línea celular conteniendo un replicón subgenómico (SG). c) Línea celular de ciclo replicativo único (CU). La evaluación sobre la línea celular conteniendo un replicón FL permite evaluar cuantitativamente la replicación del RNA viral y la síntesis del antígeno del coredel HCV. A su vez, la evaluación sobre la línea celular conteniendo un replicón SG analiza cuantitativamente la replicación de un fragmento del RNA viral codificante de proteínas no estructurales. La línea celular CU permite la evaluación de la replicación del HCV mediante un ensayo de infectividad a estudiar por citometría de flujo.

Ciencias Médicas

MEDICINA-ESPECIALIDADES BIOMEDICAS

Salud humana

Servicios de prácticas de diagnóstico y tratamiento; servicios integrados de consulta, diagnóstico y tratamiento

Actividad antiviral
interferón pegilado
Virus hepatitis C
Replicón
HCV

El cliente obtiene un informe que incluye el análisis microbiológico y molecular para la identificación de bacterias gram-negativas aerobias o anaerobias facultativas a partir de muestras procedentes de diversas fuentes. Este análisis puede incluir a pedido la identificación de bacterias gram-positivas

A partir de tres muestras ya sean de naturaleza sólida o líquida se realizan ensayos microbiológicos con medios nutritivos generales y medios selectivos o diferenciales para la identificación de las bacterias presentes en las muestras. En paralelo se realiza el recuento de colonias a partir de la muestra. En un paso posterior, se seleccionan aislamientos representativos y se extrae el ADN total usando kits comerciales. El ADN se utiliza para la detección de ácidos nucleicos por de una PCR estándar usando cebadores para la amplificación del gen 16S rRNA. En este análisis se incluye el ADN total extraído a partir de la muestra original. Aquellas reacciones que resulten positivas son secuenciadas por terceros. El posterior análisis de dichas secuencias es realizado por nuestro grupo de investigación. En el caso particular de ser solicitado por el cliente, se busca especialmente la presencia de coliformes u otros posibles patógenos bacterianos requeridos, para proveer un informe indicando la presencia o ausencia de los mismos.

Biología

BIOLOGIA-CELULAR Y MOLECULAR

Salud humana

Ensayos y análisis técnicos

microbiología
bacterias
detección molecular

Se determinarán las concentraciones mínimas inhibitorias de antífúngicos para hongos filamentosos formadores de conidias y para hongos levaduriformes, de acuerdo a las distintas normas internacionales de referencia, como EUCAST. Mediante estos test de sensibilidad antimicrobiana se podrá definir la actividad de nuevos antifúngicos y/o confirmar la sensibilidad de organismos que dan resultados equívocos o poco fiables en las pruebas de rutina.

Método de dilución para establecer la CIM de los antimicrobianos. Mediante este método se prueba la capacidad de los hongos de producir crecimiento visible en los pocillos de placas de microdilución con medio de cultivo, que contienen diluciones seriadas de los antimicrobianos (dilución en caldo). La técnica re realiza en placas de microdilución. El método se basa en la preparación de las soluciones de trabajo del antifúngico en 100 µl de volumen de pocillo al cual se le añaden 100 µl de inóculo.

Ciencias Médicas

MEDICINA-MICROBIOLOGIA

Salud humana

Cultivos temporales

CIM
Actividad Antifúngica

Diagnóstico de S. stercoralis por PCR (Reacción en cadena de polimerasa) en muestras clínicas de materia fecal. Se realiza la técnica de PCR en materia fecal para diagnóstico de S. stercoralis en pacientes inmunocomprometidos, pre trasplante, pacientes con eosinofilia o riesgo de infección por esta parasitosis.

PCR (Reacción en cadena de polimerasa) en muestras clínicas para diagnóstico de Strongyloides stercoralis Presenta una sensibilidad y un valor predictivo negativo del 100% para el diagnóstico de esta parasitosis. Es recomendable realizar en pacientes con estudios parasitológicos convencionales negativos y/o inmunocomprometidos o pre trasplante. Se utiliza mediante la extracción de ADN a partir de materia fecal fresca (no fijada) a partir de la cual se detectan secuencias específicas del parasito. El límite de detección de esta técnica es de 1larva/gr de materia fecal.

Ciencias Médicas

BIOLOGIA-MICROBIOLOGIA

Salud humana

Investigación y desarrollo experimental en el campo de las ciencias médicas | Actividades profesionales, científicas y técnicas n.c.p. | Servicios de prácticas de diagnóstico n.c.p.

Diagnóstico de helmintos
PCR de Strongyloides stercoralis

Diagnóstico parasitológico microscópico a través de cultivo de agar nutritivo para el diagnóstico de Strongyloides stercoralis. Mediante la implementación de diferentes métodos diagnósticos se realiza detección de la parasitosis en muestras de materia fecal. El estudio está orientado a pacientes inmunocomprometidos, pre trasplante, pacientes con eosinofilia o riesgo de infección por esta parasitosis.

Diagnóstico parasitológico microscópico: Examen microscópico fresco: Se homogeneizan 5gr. de materia fecal emitida recientemente con 10 ml. De solución fisiológica. Se filtrar con gasa en un tubo de 15 ml y centrifuga a 2000 rpm/2 min. Se observa el sedimento y se realiza el mismo procedimiento añadiendo una gota de lugol a la muestra. Se observa al microscopio óptico a 100X y 400X. En este procedimiento se identifican estadios larvarios, quistes y huevos. Método de Ritchie modificado: Se filtran 10 ml de la de materia fecal homogeneizada en formol al 5%, con gasa en un tubo de 15 ml. Se añaden 3 ml de éter etílico y se mezclan por 30 seg. Se centrifuga a 2000 rpm/10 min. Con una varilla se disgrega y despega del tubo el tapón de grasa superior. Se descarta el sobrenadante y el sedimento se observa en forma directa al microscopio óptico a 100X y 400X y con tinción de lugol. Mediante este procedimiento se identifican estadios larvarios de nematodes sin movilidad, quistes y huevos. Para la observación de ooquistes de coccidios intestinales (Cryptosporidium spp, Cystoisospora belli y Cyclospora cayetanensis) se utiliza la tinción de Ziehl Neelsen modificada (Botero y Restrepo, 2012). Cultivo de Agar nutritivo para Nematodes (CAN): Se colocan 3 gr de materia fecal fresca en una placa de Petri estéril (10 mm de diámetro) conteniendo 15 ml de agar nutritivo. Por paciente se realizan tres placas. Los cultivos se incuban en estufa húmeda a 28°C por 7 días. Se observan diariamente las placas para identificar visualmente los trayectos de migración de los estadios larvarios, y sus características morfológicas con lupa. Al séptimo día los cultivos son resuspendidos con formol al 5%, centrifugados a 2000 rpm/2 min., y el sedimento se observa microscópicamente para diferenciar los estadios larvarios entre S. stercoralis y uncinarias.

Ciencias Médicas

BIOLOGIA-MICROBIOLOGIA

Salud humana

Actividades profesionales, científicas y técnicas n.c.p. | Servicios de prácticas de diagnóstico n.c.p. | Investigación y desarrollo experimental en el campo de las ciencias médicas

Diagnóstico de helmintos
Cultivo en agar nutritivo para nematodes

Análisis de secuencias, ensamblado y anotación de genes, transcriptomas y genomas. El servicio cuenta con un “HPC Cluster” ubicado en el centro de cómputos de la Facultad de Medicina de la UBA. Nuestro equipo de profesionales está especializado en distintas ramas de la Bioinformática y de la Biología Molecular lo que nos permite brindar una solución personalizada para los distintos proyectos de I+D que requieran de nuestro servicio de análisis de datos.

-Procesamiento de secuencias, ensamblado y análisis de genomas y transcriptomas. -Anotación estructural y funcional. -Mapeo de lecturas, detección de polimorfismos y expresión diferencial de genes. La metodología se desarrolla a partir de publicaciones con referato internacional y los protocolos son puestos a punto por nuestro Departamento de Bioinformática. Los algoritmos volcados en scripts y programas, se configuran y adaptan al diseño experimental de cada cliente fomentando una filosofía de trabajo multidisciplinario enfocada en brindar una solución efectiva, reproducible y personalizada para cada proyecto.

Informática y Comunicaciones

BIOLOGIA

Salud humana

Procesamiento de datos | Servicios de informática n.c.p.

bioinformática
análisis de secuencias
ensamblado de genomas
genómica
anotación de genes

El curso introductorio a la Bioinformática para el análisis de secuencias de ADN contempla el asesoramiento a estudiantes de posgrado y profesionales sobre el uso y aplicación de herramientas in silico para el análisis de secuencias de ADN y proteínas, así como también para el diseño de cebadores, publicación de secuencias en la base de datos Genbank y el análisis comparativo de genomas.

La asesoría de Introducción a la Bioinformática para el análisis de secuencias de ADN se desarrolla de forma teórica y práctica. Para esta asesoría se utilizan distintas herramientas bioinformáticas, como ser: BLASTN, BLASTP, BLASTX, TBLASTN, Expasy Tools, BioEdit, clustalX y W, MEGA V6.0, Primer3, MAUVE, Artemis, ACT, (etc.)

Informática y Comunicaciones

BIOLOGIA

Prom.Gral.del Conoc.-Otras ciencias

Formación de posgrado

Bionformática
Análisis de Secuencias
Diseño de Primers

Se realizan las distintas determinaciones por el método de Kirby-Bauer y por microdilución en medio sólido usando cepas de referencia para cada microorganismo que el cliente desee ensayar.

Se realizan por triplicado la determinación de la susceptibilidad a antimicrobianos por los métodos de Kirby-Bauer y por microdilución en medio sólido siguiendo las normas internacionales del CLSI y EUCAST para cada uno de los microorganismos ensayados.

Biología

BIOLOGIA

Salud humana

Cría de animales

BACTERIAS
ANTIMICROBIANOS
ANTIBIÓTICOS
SUSCEPTIBILIDAD

La asesoría se realizará utilizando herramientas bionformáticas en colaboración con los servidores informáticos del Nodo Bioinformático del IMPaM incorporado al Sistema Nacional de Computación de Alto desempeño (SNCAD), ID 924, Resol nro: SCAT 024-14, Mayo 2014, MinCyT.

Informática y Comunicaciones

BIOLOGIA-CELULAR Y MOLECULAR

Prom.Gral.del Conoc.-Otras ciencias

Formación de posgrado

Bionformática
Genómica
Proteómica

Elaboración y presentación de un informe, detalle de medidas preventivas y correctivas según los resultados obtenidos.

Biología

BIOLOGIA-VARIAS

Prestaciones sanitarias-Servicios sanitario

Servicios veterinarios | Actividades profesionales, científicas y técnicas n.c.p.

Bioterio
Sanidad animal
Servicios veterinarios

Clases teóricas y prácticas con material didáctico. Brindar herramientas, para la validación de trabajos a realizar en Bioterios y, con el trabajo con roedores de laboratorio, priorizando la obligación ética y el respeto por el bienestar animal. Según procedimientos operativos estandarizados y cumpliendo con reglamentaciones institucionales de bioseguridad e higiene.

Biología

BIOLOGIA-VARIAS

Prom.Gral.del Conoc.-Varias ciencias

Investigación y desarrollo experimental en el campo de las ciencias médicas | Investigación y desarrollo experimental en el campo de las ciencias exactas y naturales n.c.p.

Bioterio
Capacitación en el trabajo con animales
Animales de laboratorio

La reproducción y manejo de los mismos se encuentra realizada por Técnicas de Bioterio. Las salas se encuentran un ciclo luz-oscuridad de 12 hs, con control de temperatura, humedad y renovación de aire.

Veterinaria

VETERINARIA Y ESP. PECUARIAS-VARIAS

Produccion animal

Cría de animales y obtención de productos de origen animal, n.c.p. (Incluye ciervo, gato, gusano de seda, lombriz, pájaro, perro, rana, animales para experimentación, caracoles vivos, frescos, congelados y secos -excepto marinos-, cera de insectos excepto la de abeja, etc.)

bioterio
ratones
colonia exocriada

La reproducción y manejo de los mismos se encuentra realizada por Técnicas de Bioterio. Cada cepa se encuentra alojada en salas independientes. El Bioterio de Producción cuenta con aire central, con condiciones ambientales de temperatura y humedad dentro de los rangos de termoneutralidad, con 20 renovaciones de aire/hora y ciclo luz-oscuridad de 12 hs.

Veterinaria

VETERINARIA Y ESP. PECUARIAS-VARIAS

Produccion animal

Investigación y desarrollo experimental en el campo de las ciencias exactas y naturales n.c.p. | Cría de animales | Investigación y desarrollo experimental en el campo de las ciencias médicas

bioterio
ratones
Cepas endocriadas

Las salas están acondicionadas para tal fin, con control de temperatura y humedad. El manejo está llevado a cabo por Técnicas de Bioterio, altamente capacitadas. Los ratones son monitoreados en forma constante, siguiendo procedimientos operativos estandarizados. Se dispone de cuidado veterinario permanente.

Biología

BIOLOGIA

Produccion animal

Investigación y desarrollo experimental en el campo de las ciencias exactas y naturales n.c.p. | Albergue y cuidado de animales de terceros | Investigación y desarrollo experimental en el campo de las ciencias médicas

bioterio
ratones
Housing, Hotelería o Alojamiento

Para la identificación de mutaciones asociadas a resistencia a azoles, se extrae el ADN desde un cultivo puro, se lo purifica y se amplifica la región determinada del gen cyp51 A y su promotor con primers específicos mediante PCR. Luego, los productos de las reacciones de amplificación son purificados y se realiza la reacción de secuenciación. Las secuencias obtenidas son editadas, comparadas en bases de datos públicas y analizadas con secuencias de referencia para inferir la presencia de mutaciones.

Ciencias Médicas

MEDICINA-MICROBIOLOGIA

Salud humana

Actividades profesionales, científicas y técnicas n.c.p. | Servicios de prácticas de diagnóstico n.c.p.

Identificación mutaciones
resistencia a azoles
Aspergillus fumigatus

Para la identificación molecular fúngica, se extrae el ADN desde un cultivo puro, se lo purifica y se amplifica la región determinada de un gen con primers específicos mediante PCR. Luego, el producto de la reacción es purificado y se realiza la reacción de secuenciación. La secuencia obtenida es editada, comparada en bases de datos públicas y analizadas con secuencias de referencia para inferir filogenia.

Ciencias Médicas

MEDICINA-MICROBIOLOGIA

Salud humana

Actividades profesionales, científicas y técnicas n.c.p. | Servicios de prácticas de diagnóstico n.c.p.

Identificación molecular
hongos miceliales
levaduras

Técnica de doble capa de agar para la titulación de bacteriófagos infectivos: Se prepara un cultivo en caldo tripteína de soja (TSB) de la cepa de Staphylococcus aureus sensible a la acción del bacteriófago a cuantificar creciendo a 37°C y 200 rpm hasta DO600= 0.4. Se preparan diluciones seriadas en base 10 de la suspensión fágica en TSB. En un tubo se mezclan 0.1 ml de cada dilución de la suspensión fágica y 0.1 ml de la suspensión bacteriana junto con 0.02 ml de cloruro de calcio. Al cabo de 10 minutos, se agregan 5 ml de agar tripteína de soja (TSA) blando fundido (45°C) con 0.05 ml de cloruro de calcio. Se homogeiniza y vierte cada mezcla sobre una placa de TSA. Las placas se incuban a 37°C durante 18-22 hs. Se cuentan el número de unidades formadoras de placas de lisis (UFP) y se calcula la cantidad de bacteriófagos infectantes como las UFP/ml. La cuantificación se realiza por duplicado.

Ciencias Médicas

BIOLOGIA

Salud humana

Actividades profesionales, científicas y técnicas n.c.p. | Investigación y desarrollo experimental en el campo de las ciencias agropecuarias | Investigación y desarrollo experimental en el campo de las ciencias médicas

Bacteriófagos
Rango de hospedador
Staphylococcus aureus
Bovinos
Humanos

Técnica por “spot” en agar blando: Se crece un cultivo de Staphylococcus aureus en 10 ml de caldo tripteína de soja (TSB) a 37°C y agitación (200 rpm) hasta alcanzar una densidad óptica a 600 nm (DO600) igual a 0.4. En un tubo se mezclan 0.1 ml del cultivo bacteriano junto con 5 ml de agar tripteína de soja (TSA) blando (0.75 % de agar) fundido y a la temperatura de 45°C. Se agrega 0.05 ml cloruro de calcio. Se agita evitando las burbujas y se vuelca sobre una placa de TSA (4-5 mm espesor). Luego de que solidifique, se coloca sobre la superficie blanda un “spot” de 10 µl de la suspensión del bacteriófago a evaluar. Los “spot” se realizan por duplicado para cada suspensión fágica. Las placas se incuban a 37°C durante 18-22 hs. Se registra como cepa sensible a la acción lítica del bacteriófago aquella que presente un halo claro (lisis positiva) en la zona del “spot”

Ciencias Médicas

BIOLOGIA

Salud humana

Investigación y desarrollo experimental en el campo de las ciencias agropecuarias | Actividades profesionales, científicas y técnicas n.c.p. | Investigación y desarrollo experimental en el campo de las ciencias médicas

Bacteriófagos
Rango de hospedador
Staphylococcus aureus
Bovinos
Humanos

Capacitación de posgrado con modalidad presencial y teórico-practica. El objetivo de esta capacitación se basa en presentar avances relacionados a aspectos moleculares en el campo de la parasitología. Las temáticas a abordar serán el diagnóstico y epidemiologia molecular de enfermedades parasitarias, su estado actual, nuevos desarrollos y aplicaciones en el contexto clínico.

Ciencias Médicas

BIOLOGIA-MICROBIOLOGIA

Promocion general del conocimiento

Formación de posgrado

Marcadores Moleculares
Parasitología Clínica
Diagnóstico molecular
Epidemiologia