Estudio de los mecanismos de endocitosis de nanopartículas de quitosano argentino en células humanas ARPE-19

DI SANTO MC; ALAIMO A*; LUCAS LB; PÉREZ OE* (*CORRESPONDING AUTHORS)

Mar del Plata (virtual)

Encuentro; XX Encuentro de Superficies y Materiales Nanoestructurados (Nano 2020/2021); 2021

INTEMA-CONICET

La encapsulación de bioactivos en nanopartículas (NP) permite aumentar la estabilidad de ciertos bioactivos o bien, contribuyen su llegada a tejidos diana de difícil acceso. Independientemente de la vía de administración de las NP en el organismo, los epitelios constituyen una primera barrera física frente a la penetración de sustancias externas, gracias a sus características de impermeabilidad. Las biomoléculas se internalizan en las células mediante una forma de transporte activo que se denomina endocitosis. Este proceso se clasifica en dos categorías principales: fagocitosis y pinocitosis. Esta última se subcategoriza en endocitosis mediada por clatrina, endocitosis mediada por caveolina, y macropinocitosis. En el laboratorio diseñamos y desarrollamos NP de Quitosano argentino (300kDa) por el método de gelificación iónica por entrecruzamiento con tripolifosfato de sodio. Las mismas poseen una forma esférica, un tamaño promedio de 144nm y un ζ=32mV. Además, se ha demostrado su internalización en células del epitelio pigmentario de la retina (ARPE-19, ATCC)1. Objetivo: estudiar los mecanismos de interacción de las NP con la membrana celular. Se planea pre-tratar a las células ARPE-19 con inhibidores de cada vía endocítica mencionadas anteriormente (clorpromazina, genisteína y amiloride) antes de la incubación de las NP y luego se examinarán los cambios en los patrones de captación celular en función del tiempo mediante microscopía de fluorescencia y espectrofluorometría. De este modo, este proyecto contribuirá al entendimiento de las diferentes rutas de las NP dentro de las células, lo cual es clave para el suministro de bioactivos. PÓSTER FLASH n° 46.