Impacto de la modulación farmacológica del receptor de hidrocarburo de arilo en la replicación de los flavivirus.

GIOVANNONI, F.; GARCÍA, C. C.; DAMONTE, E.B.; TORTI, M.F.; QUINTANA, F.

Buenos Aires

Congreso; XV Congreso Argentino de Microbiología CAM 2019; 2019

AAM

Introducción y Objetivos: El virus dengue (DENV) pertenece a la familia Flaviviridae y presenta cuatro serotipos capaces de causar enfermedad en seres humanos al ser transmitidos por la picadura de mosquitos infectados del género Aedes. La infección por DENV causa un amplio espectro de cuadros clínicos que varían desde infecciones asintomáticas hasta cuadros de dengue severo que presentan alta tasa de mortalidad. Actualmente no existen tratamientos específicos para combatirlo, por tanto es crucial el desarrollo de nuevas estrategias antivirales contra esta infección. El Receptor de Hidrocarburo de Arilo (AHR) es un factor de transcripción activado por ligando que se encuentra en el citoplasma celular. AHR clásicamente ha sido asociado a la depuración de xenobióticos, sin embargo, en las últimas décadas se ha encontrado que puede ser activado por compuestos que pueden provenir no sólo de la polución, sino también de la dieta, el microbioma o incluso nuestro propio metabolismo. Resultados previos de nuestro laboratorio indican que la vía de señalización de AHR se encuentra activada durante la infección por el virus Zika(ZIKV), otro miembro de la familia Flaviviridae. Mediante secuenciación masiva de ARN (RNASeq) se puso en evidencia que células infectadas con ZIKV presentan sobre-expresada la vía de señalización de AHR respecto de células control y por otro lado, se observó que el bloqueo de AHR inhibe la replicación de ZIKV in vitro. En el presente trabajo nos propusimos evaluar el impacto de la modulación farmacológica de AHR en la replicación de DENV in vitro. Materiales y Métodos: Se emplearon ligandos agonistas y antagonistas de AHR para tratar cultivos celulares de células A549 previo a la infección con DENV 1-4. A partir de los sobrenadantes del cultivo, se determinó el rendimiento viral mediante titulación por formación de placas de lisis bajo metilcelulosa. Por otro lado, a partir de las monocapas de células infectadas, se llevaron a cabo ensayos de inmunofluorescencia indirecta y de RTPCR en tiempo real para cuantificar la expresión de proteína y genoma viral, respectivamente.