ACTIVIDAD ANTIVIRAL in-vitro DE TRIFLUOPERAZINA FRENTE A LOS VIRUS DENGUE Y ZIKA

LUANA É PICCINI; VIVIANA CASTILLA; ELSA B. DAMONTE

CABA

Congreso; XV Congreso Argentino de Microbiología; 2019

Asociación Argentina de Microbiología

Los virus del dengue (DENV) y Zika (ZIKV) son arbovirus pertenecientes a la familia {Flaviviridae}, ambos son agentes etiológicos de patologías humanas ampliamente distribuidas y carentes de tratamientos antivirales específicos. Existen antecedentes de actividad antiviral de las fenotiazinas trifluoperazina (TFP) y clorpromazina frente a distintos arenavirus, incluído el virus Junín, agente de la fiebre hemorrágica argentina. A su vez, esta última inhibe la infección por DENV. Por su parte, TFP es una de las más potentes drogas neurolépticas de empleo frecuente como agente psicotrópico. Por lo tanto, nos propusimos investigar la potencial actividad antiviral de esta droga, cuyo uso farmacológico en humanos está aprobado, frente a DENV y ZIKV en cultivos de células.La citotoxicidad se evaluó por el método de MTT en las líneas celulares Vero, A549 y Huh.7, determinando la concentración citotóxica 50% (CC_50). La actividad antiviral se evaluó por un ensayo de inhibición del rendimiento viral, que permitió el cálculo de la concentración efectiva 50% (CE_50). La expresión de la proteína viral E se analizó mediante ensayos de inmunofluorescencia. Para estudiar el mecanismo de acción se realizó el agregado a distintos tiempos de compuesto y particularmente se evaluó el efecto sobre la adsorción e internalización viral mediante rendimiento viral. Los valores de CC_50 de TFP para las células Vero, A549 y Huh.7 fueron de 49, 61.7 y 54 µM, respectivamente. TFP presentó actividad antiviral en células Vero frente a los cuatro serotipos de DENV, DENV-1 a DENV-4, y ZIKV (CE_50 5.5, 6.3, 6.4, 5.1 y 5.0 µM respectivamente). También se evaluó su acción inhibitoria frente a DENV-2 y ZIKV en células A549 obteniéndose valores de CE_50 de 8.3 y 18.7 µM, respectivamente, en tanto que no tuvo actividad frente a ambos virus en células Huh.7. El estudio del efecto de variaciones en el tiempo de adición del compuesto en células Vero infectadas con DENV-2 mostró una fuerte actividad antiviral de TFP en las primeras horas de infección y menor acción a tiempos posteriores. Cuando el compuesto estuvo presente durante la adsorción e internalización viral la inhibición del rendimiento de DENV-2 fue del 90%. La inhibición en la expresión de glicoproteína E de DENV-2 en células Vero fue de 85%.