RIBOPROTEOMA DE SACCHAROMYCES CEREVISIAE DURANTE QUIESCENCIA Y REACTIVACIÓN TRADUCCIONAL POR ESTIMULO DE NUTRIENTES

PAULA PORTELA; CLARA ANDREA SOLARI

Bariloche

Jornada; 6tas Jornadas de Biología y Biotecnología de Levaduras; 2018

Cuando los nutrientes se consumen Saccharomyces cerevisiae entra en quiescencia, y reingresa al ciclo celular cuando los nutrientes vuelven a estar disponibles. La regulación traduccional es fundamental para modificar el proteoma celular y determinar, por ejemplo, cambios en el ciclo celular. Para caracterizar la maquinaria traduccional en las fracciones monosomal y polisomal de células wt en fase estacionaria (SP) o luego de un estímulo con medio fresco de 30 o 60 minutos usamos nano-LC MS/MS y estimaciones de abundancia proteica usando el índice de abundancia proteica exponencialmente modificado (emPAI). En SP la traducción global se encuentra inactiva, luego de 30 minutos de estímulo aún no se reactivaron totalmente los niveles, y a los 60 mipnutos los perfiles polisomales son similares a los presentados en fase exponencial. El análisis proteómico mostró diversos grupos, además de traducción y plegamiento de proteínas, asociados a ribosomas en las condiciones en estudio. Sólo los monosomas de todas las condiciones mostraron un subset de proteínas involucradas en degradación de proteínas. Análisis de enriquecimiento indicaron que la condición de 30 minutos sería una condición regulatoria, altamente enriquecida en proteínas involucradas en el procesamiento de aminoácidos. Las proteínas ribosomales Rpl31B y Rps0B están presentes únicamente en el monosoma de SP. Análisis de abundancia proteica mostraron que factores como Stm1 -factor clave para la correcta traducción durante estrés- y chaperonas como Ssb1 y Ssb2 se asocian a monosomas en SP. Los polisomas de SP tienen asociados factores de elongación de la traducción y esta asociación disminuye con el estímulo. Hsp26 se encuentra asociada a monosomas y no en polisomas, y su asociación no depende del estímulo. Estos resultados profundizan en la regulación del control traduccional por estimulo de nutrientes y sugieren que las levaduras quiescentes modificarían su maquinaria traduccional vía cambios en el core ribosomal o proteínas accesorias.