Modificación de electrodos serigrafiados para el desarrollo de biosensores basados en aptámeros

CORTÓN E; SACCO NJ; BONETTO MC,

CABA

Jornada; Jornadas Interdisciplinarias de Química Biológica; 2017

FCEN-UBA.

Un biosensor es capaz de proporcionar información analítica cuantitativa o semi-cuantitativa, compuesto por un elemento de reconocimiento biológico en íntimo contacto con el transductor, que permite procesar la señal generada por la interacción entre el elemento de reconocimiento y el analito, transformándola en información específica. El material biológico, puede ser enzimas, bacterias, aptámeros, etc1. Este le confiere la selectividad al biosensor mientras que el transductor confiere sensibilidad. Los aptámeros son ligandos de cadena simple de ácidos nucleicos (RNA o DNA) que tienen una alta afinidad y especificidad con otras moléculas. El objetivo principal de nuestro trabajo es el desarrollo de biosensores descartables basados en aptámeros para la detección directa de diferentes microorganismos. En este trabajo se utilizaron electrodos serigrafiados de pasta de carbono los cuales fueron modificados con nanotubos de carbono (nt) oxidado y quitosano para favorecer la interacción de los electrodos con los aptámeros. El principio de detección se basa en la utilización del marcador redox [Fe (CN)6]3- / [Fe (CN)6]4- utilizando las técnicas de voltametría cíclica (VC) y espectroscopia electroquímica de impedancia. Se realizaron ensayos donde se pudo determinar el mejor método de oxidación de los nt, optimización de las concentraciones de nt así como de quitosano. Pudimos observar que la modificación del electrodo mejora notablemente la conductividad, facilitando la transferencia de electrones entre la solución y la interfaz del electrodo. Esto se vio reflejado en los aumentos de las corrientes pico anódicas y catódicas obtenidas en las VC 46,6% más que los sin modificar. Actualmente estamos trabajando en las etapas de optimización del aptasensor: inmovilización del aptámero (reconoce una proteína de membrana E. coli), bloqueo (para prevenir la adsorción inespecífica), y reconocimiento del aptámero con la molécula diana (E. coli). Una vez obtenido el aptasensor se determinarán el límite de detección, respuesta lineal, especificidad y selectividad del mismo.