de estructura de la enzima beta-Galactocidasa por el encapsulamiento en una matriz mesoporosa de gel de silicato.

MARÍA ANGÉLICA PERILLO; MARTHA INES BURGOS; AYLÉN OCHOA

Córdoba

Encuentro; VI Encuentro Argentino de Materia Blanda; 2016

La síntesis de geles de silicato por el método sol-gel en condiciones suaves de pH y temperatura permite atrapar proteínas con actividad biológica mientras que no impide la difusión de moléculas pequeñas a través de la matriz mesoporosa.En estudios previos, determinamos que la enzima -Galactosidasaencapsulada (E-Gal) presenta igual o mayor actividad catalítica que la enzima soluble y propusimos que la estructuración de las moléculas de agua en los nano poros del gel tendría importancia significativa en las diferencias observadas para la hidrólisis de ONPG en geles frescos y envejecidos a diferentes periodos de tiempo. Esta observación fue sustentada por experimentos de 1H-RMN. En el presente trabajo se estudiaron los cambios en la estructura de -Gal al ser confinada en el gel de silicato por espectroscopia de fluorescencia y dicroísmo circular (DC). El espectro de emisión de fluorescencia de E-Gal evidencia un corrimiento del centro de masa de 3 nm hacia mayores longitudes de onda respecto a la enzima soluble. Este efecto indica que los triptófanos de la proteína encapsulada se encuentran en un entorno menos hidrofóbico (o de mayor constante dieléctrica) lo que podría deberse a un pérdida de compactación global de la estructura terciaria o a que el agua que se encuentra en los poros del gel tenga un valor de constante dieléctrica diferente al del agua libre. Los resultados de (DC) evidenciarían cambios en la estructura secundaria de E-Gal respecto a la forma soluble producto de un aumento de la proporción de aminoácidos en forma hélice-.