Localización de Thiazinas en liposomas.

VARA J; SANCHEZ JM; PERILLO MA; ORTIZ C S

Córdoba

Congreso; VI Congreso Iberoamericano de Ciencias Farmacéuticas (COIFFA); 2015

CONFERENCIA IBEROAMERICANA DE FACULTADES DE FARMACIA A.C.

Las Thiazinas soncompuestos aromáticos tricíclicos catiónicos que tienen la capacidad deexcitarse a longitudes de onda superiores a 600nm y desencadenar la formaciónde oxígeno singlete, un importante agente citotóxico. Esta característica, lasconvierte en Fotosensibilizadores (Fs) ampliamente investigados para eltratamiento de numerosas patologías.  Afin de optimizar las propiedadesfototerapéuticas, estos agentesfueronvehiculizados en diferentes sistemas de vectorización dando origen a numerososFs de tercera generación.El objetivo delpresente trabajo fue evaluar la localización de dos Thiazinas,  Azure B (AzB) y Azure B monobromado (AzBBr),en  liposomas multilamelares  (MLVs) de fosfatidilcolina de huevo (eggPc).En una primera etapa, sedeterminó la constante de partición (Kp) de los Fs en la membrana de eggPc, afin de establecer si estos compuestos se incorporan en la fasehdrofóbica ohidrofílicade los MLVs.  El efecto de agregaciónde AzB y AzBBr, relacionado con el fenómeno de partición, fue evaluado,medianteespectrofotometría UV-Visible, en función de la concentración de eggPc (0-1mg/mL)en un volumen final constante.Por otra parte,se estimó la localización de losFs en la membrana liposomal mediante variaciones en la intensidad defluorescenciacorrespondiente a las Thiazinaspor transferencia de energía (FRET)con dos fluoróforos, Difenilhexatrieno (DPH; 1,5-15mM)quese sitúa en el centro lipofílico de la membrana, y TrimetilamonioDifenilhexatrieno(TMA-DPH; 1,5-15mM), que se localiza en la regiónpolar de la bicapalipídica.Los valores de LogKp obtenidos para AzB (2,29) y AzBBr (2,54) indicaron que ambos compuestos tiendena particionarse en la membrana lipídica. Al evaluar la localización enmembrana, se observó que tanto DPH como TMA-DPH tienen la capacidad detransferir su energía a los Fs. Sin embargo,  elaumento exponencial en la intensidad defluorescencia de los Fs en función de la concentración deambos fluoróforos fuemás marcado en presencia de TMA-DPH, lo cual indica que AzB y AzBBr selocalizan principalmente en laregión polar de la bicapa lipídica. Los resultados obtenidos se corresponden con las característicasestructurales que presentan las Thiazinas, compuestos aromáticos tricíclicoscatiónicos que tienen afinidad por la superficie hidrofílicadel sistema devehiculización empleado. En conclusión,ambos Fs interaccionan con la membrana de los MLVs de eggPc,localizándosepreferentemente en la superficie en correspondencia con las característicasanfotéricasquepresentan las moléculas Thiazínicas.