CONTRATADOS
TARGOVNIK Hector Manuel
congresos y reuniones científicas
Título:
Defectos de organificación del Yodo. Análisis Molecular de los genes de TPO y DUOX2
Autor/es:
BELFORTE, FIORELA SABINA; OLCESE, MARÍA CECILIA; CITTERIO, CINTIA ELIANA; MIRAS, MIRTA B.; CHIESA, ANA; GRUÑEIRO-PAPENDIECK LAURA; GONZÁLEZ-SARMIENTO, ROGELIO; TARGOVNIK , HÉCTOR MANUEL; RIVOLTA, CARINA MARCELA
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; LV Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica.; 2010
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Investigación Clínica.
Resumen:
Los defectos de organificación de yodo representan el 10% de los casos de hipotiroidismo congénito, el cual posee una prevalencia de 1/2500 y un modo de herencia autosómico recesivo. En el presente trabajo se extendió la búsqueda inicial de nuevas mutaciones en los genes de tiroperoxidasa (TPO) y dual oxidasa 2 (DUOX2) en una población de 40 pacientes con diagnóstico de hipotiroidismo congénito, bocio y test de descarga de perclorato positivo. Se amplificaron por PCR el promotor, los 17 exones de TPO, los 33 exones de DUOX2 y sus regiones intrónicas flanqueantes. Los productos fueron analizados por SSCP y aquellos con migración diferencial fueron secuenciados. Dos mutaciones: p.R396fsX472 en TPO y p.A1088fs1100 en DUOX2 fueron evidenciadas por clonado en el vector pGEM-T y por RFLP empleando las enzimas Nae I y BsaH1 respectivamente. Se procedió al análisis bioinformático predictivo de la estructura secundaria y terciaria de las proteínas mutadas y a la exploración del grado de conservación evolutiva de las mismas en distintas especies. En el gen de TPO se identificó un paciente doble heterocigota para la mutación conocida 1187insGGCC; p.R396fsX472 (exón 8) y para una nueva mutación: c.1874G>A;p.R595K (exón 11). Se identificó en otro paciente una nueva mutación heterocigota c.2332G>A;p.V748M (exón13) junto con una variante rara de secuencia g.IVS13-17C>T. Adicionalmente se hallaron 4 polimorfismos, 3 nuevos: g.-605C>T (promotor), g.IVS2-30G>A, g.IVS4+31C>A y uno descripto: c.2545T>C; p.V847A. En DUOX2 se identificó una nueva mutación heterocigota c.3264_327delCAGC;p.A1088fs1100 (exón 24) y dos variantes raras de secuencia: gIVS27+9C>T (Intrón 27) y c.3042G>A;p.A1014A (exón 24) en pacientes no relacionados. Las técnicas de biología molecular empleadas constituyen una herramienta útil para la comprensión de la fisiopatología del hipotiroidismo neonatal, por otra parte contribuirán al diagnóstico temprano y al adecuado asesoramiento genético a las familias afectadas. 
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