REGULACIÓN DE LA ACTIVIDAD DEL RECEPTOR GLUCOCORTICOIDE POR LA SEÑALIZACIÓN DEL RE - CEPTOR CANNABINOIDE TIPO 1

GRANJA GALEANO, GINA; DOMINGUEZ-RUBIO, ANA PAULA; ZAPPIA, CARLOS DANIEL; FITZSIMONS CARLOS; FRANCHI, ANA; MONCZOR FEDERICO

Mar del Plata

Congreso; LVIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2013

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

p { margin-bottom: 0.21cm; direction: ltr; color: rgb(0, 0, 0); }p.western { font-family: "Times New Roman",serif; font-size: 10pt; }p.cjk { font-family: "Times New Roman",serif; font-size: 10pt; }p.ctl { font-family: "Times New Roman",serif; font-size: 10pt; } Los receptores del sistema cannabinoide (CB) y del sistema glucocorticoide se coexpresan en diversas áreas del sistema nervioso central (SNC), incluyendo el hipocampo, una estructura involucrada en procesos de aprendizaje y memoria. Se ha sugerido que el sistema cannabinoide participa en los mecanismos moleculares regulados por el GR en el hipocampo. Observaciones previas han sugerido que el efecto de CB sobre el sistema glucocorticoide involucra la interacción especifica con subunidades de las proteínas G. El objetivo del presente trabajo es estudiar el efecto de la activación del receptor a cannabinoides de tipo 1 (CB1) sobre la actividad transcripcional del receptor a glucocorticoides (GR). Para ello, células de neuroblastoma N2A que expresan ambos receptores endógenamente, se transfectaron con un sistema reportero de actividad transcripcional del GR (TAT3-LUC) y se evaluó la respuesta a Dexametasona (Dex) en presencia y ausencia de ligandos del CB1. La respuesta máxima a Dex disminuyó en presencia de los agonistas CB1 directos ACPA, CP55940, HU210, que reducen los niveles de AMPc, como de los agonistas inversos CB1 AM251 y O-2050, que aumentan los niveles del segundo mensajero. Con el objetivo de investigar el rol de las subunidades Gβγ, se sobreexpresaron distintas isoformas (β1, β2, γ2, γ5 y γ11). Nuestros resultados demuestran que sólo la sobreexpresión de γ2 es efectiva, disminuyendo significativamente la respuesta máxima a Dex. Con el fin de validar el efecto inhibitorio de CB1 sobre la actividad transcripcional del GR in vivo, se estudió la respuesta a Dex en el hipocampo de ratones CD1 (30-35g) con fenotipo salvaje y knock-out CB1-/-. Usando PCR cuantitativa para evaluar la expresión de dos clásicos genes regulados por GR, GILZ y SLC19A. Los ratones se trataron vía i.p. con 100 µl de solución fisiológica (vehículo) o con 100 µl de Dexametasona Fosfato Sódico 0,54 mg/ml. A las seis horas se sacrificaron por dislocación cervical. La inyección i.p. de Dex provocó un aumento del 50% en la expresión de ambos genes en los ratones CB1 -/-. Nuestros resultados indican que la activación del CB1 ejerce un efecto inhibitorio sobre la actividad transcripcional del GR en el hipocampo, que estaría mediado por las subunidades γ2 y no por cambios en la concentración intracelular de AMPc, ya que tanto agonistas directos como inversos mostraron el mismo efecto. El efecto inhibitorio del CB1 se observó en células aisladas y también en el hipocampo in vivo. Nuestros resultados indican la existencia de un nuevo mecanismo molecular por el cual el sistema cannabinoide podría regular la respuesta genómica a glucocorticoides en el hipocampo. Este mecanismo podría tener implicancia en procesos de aprendizaje y memoria que involucran el hipocampo.