Regulación dual del sistema glucocorticoide por la señalización del receptor H1 a histamina. Rol de las vías canónicas y no-canónicas

ZAPPIA, CARLOS DANIEL; GRANJA GALEANO, GINA; FERNANDEZ NATALIA; FITZSIMONS CARLOS; MONCZOR FEDERICO

Mar del Plata

Congreso; LVII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2012

Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC)

Diversos reportes señalan la interacción entre la señalización de receptores acoplados a proteína G y del receptor a glucocorticoides (GR). El objetivo del presente trabajo es estudiar la modulación de la actividad del GR por parte de ligandos del receptor H1 a histamina (rH1, acoplado a Gq), dado que existen numerosas situaciones en que ligandos de ambos sistemas son coadministrados, incluso en una misma formulación. Para ello se cotransfectaron celulas HEK293T con el rH1, el GR y un sistema reportero TAT3-LUC. En este sistema la histamina incrementa en un 300% la respuesta a dexametasona (Dex) 0,1nM, en forma dosis dependiente, sin afectar la pCE50 (11,6±0,2). Para investigar el rol de las subunidades Gbeta/gamma, se sobreexpresó Galfa transducina como secuestrador de las mismas. En estas condiciones, la potenciación por parte de histamina fue revertida, transformándose en una inhibición. Los resultados sugieren un efecto dual de la histamina sobre la actividad del GR: potenciador mediado por las subunidades beta/gamma, e inhibitorio en ausencia de ellas. Cotransfectando con diversas combinaciones de Gbeta y Ggamma identificamos las subunidades beta2gamma5 y beta2gamma11 como responsables del efecto potenciador. Por otra parte, mediante el uso de inhibidores farmacológicos y una mutante de Rac dominante negativa (RacN17), observamos que el efecto inhibitorio sería mediado por PLC y Rac, pero no PKC. Para evaluar la modulación sobre la expresión de genes endógenos regulados por Dex en un sistema nativo, transfectamos células A549 con el rH1. En este sistema histamina incrementó la expresión relativa del gen ThBD mediada por Dex (50%), y dicho incremento fue mayor en presencia de beta2gamma5 (100%). Estos resultados resultan consistentes con los obtenidos para el sistema reportero y echan luz sobre el mecanismo molecular de interacción entre ambos sistemas, lo cual resulta de suma relevancia dado que ligandos de los mismos se encuentran entre los mas vendidos y utilizados en el mundo.