Interacción entre el receptor a Canabinoides tipo I y el receptor a Glucocorticoides – Relevancia de las proteinas G.

TUBIO MARIA ROSARIO; SHAYO CARINA; DAVIO CARLOS; FITZSIMONS CARLOS; MONCZOR FEDERICO

Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina

Congreso; LIV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2009

SAIC

En la actualidad existen diversos reportes acerca de la interacción entre la señalización de receptores acoplados a proteínas G (GPCRs) y del Receptor a Glucocorticoides (GR), pero aún no han sido completamente esclarecidas. Por otro lado, recientemente ha sido reportado que las subunidades βγ de la proteína G interactúan directamente con el GR atenuando su actividad. La expresión funcional del CB1R (Receptor a Canabinoides tipo 1, un GPCR acoplado a Gi/0) y del GR en células de neuroblastoma murino N1E-115 ya ha sido descripta. Nuestro objetivo es determinar si ligandos agonistas y agonistas inversos del CB1R son capaces de modular la actividad pro-transcriptora del GR en células N1E-115 y si dichas subunidades βγ están involucradas en tal proceso. Para ello, en células N1E-115 transfectadas de manera transiente con la construcción reportera TAT3-Luciferasa (consta de tres GRE fusionados al promotor mínimo y gen de Luciferasa de Drosofila), realizamos ensayos de concentración-respuesta (C-R) a Dexametasona (Dex) en presencia y ausencia de ligandos del CB1R, o frente a la sobreexpresión de distintas isoformas de subunidades β o γ (β1, β2, γ2, γ5 y γ11). Determinamos que la respuesta máxima a Dex disminuye un 37%, 30%, 75%, 39% y 23% en presencia de ACPA, CP55.940, HU210, AM251 y O-2050 respectivamente (p<0,05). En este sistema, mediante la cuantificación del AMPc formado en ensayos de C-R, determinamos que ACPA, CP55.940 y HU210 se comportan como agonistas, y AM251 y O-2050 como agonistas inversos, del CB1R. De todas las isoformas de β y de γ evaluadas, sólo la sobreexpresión de γ2 modifica la respuesta máxima a Dex significativamente (48% de disminución; p<0,0001). Estos resultados sugieren la existencia de una interferencia en la actividad del GR relacionada con la señalización evocada por los ligandos del CB1R, tanto agonistas como agonistas inversos, en la cual probablemente la modulación de los niveles de subunidades βγ libres esté involucrada.