AVANCES EN LA TIPIFICACIÓN GEN-ESPECÍFICA DEL MHC EQUINO

DÍAZ, S.; MANGANARE D. M.; PERAL GARCÍA P.; GIOVAMBATTISTA G.

San Miguel de Tucumán, Tucumán.

Congreso; XXXVIII Congreso Argentino de Genética; 2009

SAG

Las características de los genes del MHC los hacen excelentes marcadores moleculares para estudios genéticos poblacionales, evolutivos y de asociación con enfermedades infecciosas y autoinmunes. Condición indispensable es contar con sistemas de tipificación altamente específicos, que en equinos no están estandarizados. Dentro del MHC, los genes DRB tienen un rol protagónico en el procesamiento y presentación de antígenos y son variables en el dominio proteico de interacción con antígenos, codificado en el exón 2. En equinos se ha reportado la presencia de tres genes DRB funcionales, y 20 alelos del exón 2, pero estos alelos no han sido asignados a un gen en particular, y los métodos de detección disponibles hasta el presente no discriminan entre las diferentes copias del gen. Se caracterizaron las secuencias comprendidas entre el promotor y el exón 3 para comparar las diferenciales entre las copias de los genes ELA-DRB con el fin de desarrollar métodos de tipificación gen específico. En base a las secuencias genómicas reportadas en el Genoma Equino se diseñaron 13 cebadores que combinados permiten amplificar subregiones dentro de esta zona en 15 caballos de diferentes razas equinas. Las secuencias de los productos de amplificación se determinaron por secuenciación directa. Los resultados obtenidos demostraron que: 1) existen mas de tres genes DRB y pseudogenes; 2) se asignaron los alelos reportados a los genes DRB2, DRB3 y DRBy1;  3) no se pudo detectar la presencia del gen DRB1 en los animales analizados; 4) se describen nuevos alelos del promotor y de los exones 2 y 3; y 5) se reporta la presencia de un microsatélite en el intrón 2 proximal. La información obtenida permitió el desarrollo de métodos de tipificación específicos para los genes DRB2 y DRB3.