EXPRESIÓN GÉNICA DE TRANSPORTADORES DE ZINC EN EL COMPLEJO OVOCITO-CÚMULUS BOVINO: INFLUENCIA DE TRES HORMONAS REPRODUCTIVAS

NIKOLOFF N; ANCHORDOQUY JM; QUINTANA S; ANCHORDOQUY JP; PASCUA AM; SIRINI MA; FURNUS CC

Ciudad Autónoma de Buenos Aires

Congreso; 3 ° Congreso Internacional de la Sociedad Argentina de Tecnologías Embrionarias; 2016

Sociedad Argentina de Tecnologías Embrionarias

El zinc (Zn) interviene en una amplia variedad de procesos celulares y su disponibilidad tiene influencia sobre distintos procesos reproductivos y en el desarrollo embrionario. Sin embargo, los mecanismos que regulan la homeostasis del Zn en el complejo ovocito-cúmulus (COC) y otras células del aparato reproductor, han sido poco estudiados. Para evaluar la entrada y salida de Zn a la célula es indispensable analizar la expresión de los transportadores de este micronutriente. En este sentido, se evaluó la expresión de ARNm de cuatro transportadores de Zn (ZIP 6 y Znt 3, 7 y 9) en ovocitos y células del cúmulus de bovino bajo la influencia de tres hormonas reproductivas: estradiol (E2), hormona folículo estimulante (FSH) y luteinizante (LH). Para ello, los COCs se maduraron in vitro durante 24 hs con los siguientes tratamientos: (1a) suplementación hormonal (E2 1µg/ml, FSH 1 µg/ml, LH 10 µg/ml) más el agregado de 120 µg/dl Zn (concentración normal) y (1b) suplementación sólo hormonal. Se realizaron controles de maduración sin hormonas: (2a) bajo suplementación con Zn, (2b) sin suplementación con Zn. Luego, se extrajo ARN, se lo digirió con DNAsa y se estudió mediante RT-PCR la presencia o ausencia de ARNm en ovocitos y células del cúmulus. Los resultados obtenidos muestran por primera vez la expresión del ARNm de los transportadores ZIP 6 y Znt9 en el ovocito bovino, mientras que en las células del cúmulus se expresan Znt 9 y Znt 3. No se detectó ARNm correspondiente a Znt 7 en ninguno de los de los tipos celulares mencionados. Los resultados de expresión correspondiente a cada tratamiento se muestran a continuación:Tipo celularT=0 de maduraciónSuplementación hormonalSin suplementación hormonalCon ZnSin ZnCon ZnSin ZnZip6Ovocitos+-+++Cúmulus-----Znt3Ovocitos-----Cúmulus-+-+-Znt7Ovocitos-----Cúmulus-----Znt9Ovocitos---++Cúmulus-+---En conclusión, en cuanto a los ovocitos, no se registró expresión de ZIP 6 luego de la maduración con zinc bajo la acción de las hormonas estudiadas, y tampoco la de Znt 9 con suplementación hormonal, en presencia o ausencia de zinc. Por otra parte, en el cúmulus, Znt 9 no se expresó en ningún caso bajo acción hormonal, así como Znt 3 en ninguna situación de ausencia zinc. Vale destacar la expresión positiva de ZIP 6 ya en el ovocito inmaduro. Aunque estos estudios deben ser llevados a mayor profundidad mediante un análisis de expresión con discriminación de cada hormona agregada, estas diferencias sugieren que las hormonas reproductivas incidirían en la expresión génica de los transportadores estudiados.