EFECTO DE DIFERENTES NIVELES EN EL APORTE DE COBRE SOBRE LA INTEGRIDAD ESTRUCTURAL DEL ADN DE CELULAS DEL CUMULUS

PICCO SJ; SEOANE A,; ANCHORDOQUY JP; ANCHORDOQUY JM; ROSA DE; FAZZIO LE; MATTIOLI GA; ERRECALDE AL, FURNUS CC.

La Plata

Congreso; Congreso Argentino de Ciencias Morfológicas; 2008

Sociedad de Ciencias Morfológicas de La Plata

La presencia de células del cúmulus que rodean a los ovocitos durante la maduración, juegan un rol importante en su capacidad de desarrollo posterior hasta el estadio de blastocisto. Esto se debe a que las células se hallan unidas metabólicamente a través de uniones GAP que conectan ,a las células del cúmulus entre sí y con el ovocito, interviniendo en el soporte metabólico del mismo, transportando moléculas de bajo peso molecular, iones y aminoácidos. La deficiencia de Cu es una carencia nutricional caracterizada por la paulatina disminución en la actividad de diferentes enzimas Cu-dependientes, muchas de las cuales participan del mantenimiento del estatus antioxidante celular (Cu/Zn-superoxido dismutasa, citocromo c-oxidasa, ceruloplasmina, etc). Estudios recientes han demostrado la existencia de alteraciones oxidativas y daño en el ADN, asociados con bajos niveles orgánicos de Cu. El objetivo del presente trabajo fue evaluar la integridad del ADN de las células foliculares del cúmulus que forman el complejo ovocito-cúmulus (COCs), por exposición a diferentes niveles de Cu durante la maduración in vitro de ovocitos bovinos. Para ello, se obtuvieron COCs de ovarios de frigorífico y se maduraron in vitro en medio TCM 199 suplementado con suero y hormonas durante 24 hs a 39°C en atmósfera gaseada al 5% de CO2. Los COCs se dividieron en 4 grupos y se maduraron en distintas condiciones de disponibiliodad de Cu: A) Control: Medio sin suplementar (niveles basales de Cu: 4µg/dl), B) Deficiencia severa: 20µg/dl, C) Deficiencia moderada: 40µg/dl y D) Valores normales: 60µg/dl. El análisis de integridad del ADN se realizó a partir del “ensayo cometa” en su versión alcalina. Los mayores porcentajes de células con daño en el ADN se obtuvieron en los grupos A y B (63,02 y 8,89%  respectivamente), observándose una notoria disminución de las células con daño en el ADN a medida que aumentaron los niveles de Cu (Grupo C: 30,04% y Grupo D: 32,32%). El índice de daño en el ADN (ID) fue el mejor indicador para expresar el impacto de diferentes niveles de Cu (A: 165,73; B: 127,66; C: 51,92; D: 48,79), presentando una correlación inversa (R2: 0,92). Los presentes resultados sugieren que adecuados niveles de Cu tendrían un impacto beneficioso sobre la integridad de los núcleos de las células del cúmulus durante la maduración.