Daño celular en linfocitos bovinos tratados con el antiparasitario doramectina.

RESASCO A; VINOCUR F; ANTONINI AG; SEOANE AI

Mar del Plata

Congreso; VIII Jornadas Internacionales de Veterinaria Práctica; 2013

Colegio de Veterinarios de la Provincia de Bs. As.

Los endectocidas son antiparasitarios de uso veterinario a nivel mundial para el control de nematodos y artrópodos que afectan al ganado (Lanusse et al., 1997). La doramectina es una droga biosintética derivada de la fermentación de la ivermectina que se caracteriza por su actividad frente a parásitos internos y externos. La forma en que la droga se distribuye y se elimina en el organismo es relevante a la salud pública por la posibilidad de inducir efectos secundarios negativos (posiblemente cancerígenos) asociados al consumo de alimentos de origen animal (Udroi, 2007). Desde un punto de vista ecológico, es relevante por su incidencia sobre la microfauna del suelo, ya que la mayor parte de este antiparasitario (> 98%) se elimina por las heces de forma no metabolizada (Beynon, 2012). En este sentido hay estudios que indican que los residuos de este fármaco en la materia fecal pueden ser tóxicos para los insectos que habitan en el estiércol afectando la diversidad de los mismos y reduciendo su actividad. El presente trabajo se realizó con el propósito de evaluar posibles efectos citotóxicos sobre células de sangre periférica bovina en condiciones in vitro. MATERIALES Y MÉTODOS Para la realización de los ensayos se diluyó la preparación comercial de doramectina al 1% ?Dectomax? (Pfizer) en dimetilsulfóxido (DMSO) 1:1 y luego esta solución fue diluída 1:5000 en agua destilada estéril obteniéndose una solución de trabajo (ST) de 2 µg/ml; de esta manera, las concentraciones finales alcanzadas luego de agregar 100, 200 o 300 µl de ST en 10 ml de medio de cultivo fueron: 20, 40 y 60 ng/ml. Se incluyó un control de DMSO. Se utilizaron linfocitos de sangre periférica bovina estimulados con fitohemaglutinina y cultivados en suspensión en frascos Falcon empleando como medio de cultivo Ham F12 suplementado con 10% de suero fetal bovino y antibióticos durante 54 hs. La evaluación de citotoxicidad se llevó a cabo mediante el análisis del Índice Mitótico que consiste en el conteo de la frecuencia de células en división con respecto al total de células observadas. Las células se tiñeron con colorante Giemsa al 5% durante 10 minutos, se contaron 1000 células por tratamiento. El análisis estadístico se realizó mediante el test de Chi cuadrado. RESULTADOS La frecuencia de metafases observadas (desvío estándar entre paréntesis) en cada caso fue: control negativo= 23? (±0.023), control DMSO= 20,5? (±0.021), dosis 1= 22,5? (±0.023), dosis 2= 17,5? (±0.018) y dosis 3= 15? (±0.015). DISCUSIÓN Si bien los resultados no muestran diferencias significativas cuando se compara el control negativo con los tratamientos con doramectina (X2=2,411; p=0.49), se observa una tendencia a la disminución de la frecuencia de células en división a medida que aumenta la concentración del producto ensayado. CONCLUSIONES Los resultados indican que la doramectina puede afectar el crecimiento y la división en células de sangre bovina. Las dosis empleadas no provocan un aumento significativo del daño de manera que se realizarán nuevos desafíos experimentales para ajustar las dosis empleadas y evaluar la posible inducción de genotoxicidad a través de los ensayos de micronúcleos y electroforesis de una sola célula. En el largo plazo es importante llevar a cabo estudios que permitan evaluar los efectos que esta droga pueda ocasionar en el animal, los consumidores y el medio ambiente.