GENOTIPIFICACIÓN DEL GEN TNF-α EQUINO POR PIROSECUENCIACION.

DIAZ S.; FRANCISCO E.I.; KALEMKERIAN P.B.; PERAL GARCIA P.; GIOVAMBATTISTA G.

Viñas del Mar

Congreso; Congreso de la Asociación Latinoamericana de Genética (ALAG) 2010, XXXIX Congreso Argentino de Genética; 2010

Sociedad Chilena de Genética

El Factor de Necrosis Tumoral (TNF-α) ha sido asociado con niveles diferenciales de expresión, enfermedades autoinmunes y susceptibilidad a enfermedades infecciosas en diferentes especies de mamíferos. En humanos esta asociación se realizo mediante SNPs presentes en la región promotora del gen. El objetivo de este trabajo consistió en desarrollar una metodología de detección de SNPs en la región proximal del promotor basada en pirosecuenciación, para aplicarla a la caracterización poblacional y a estudios de asociación con enfermedades equinas. Se diseñó una estrategia de PCR-anidado con un primer biotinilado, y el promotor se amplificó en 283 caballos pertenecientes a 7 razas equinas. El producto de PCR purificado con estreptavidina se usó como molde para la reacción, y la pirosecuenciación se realizó con un cebador interno complementario a las 15 bases previas al primer SNP. El análisis de los pirogramas obtenidos demostró que los tres SNPs se encuentran en desequilibrio de ligamiento (p