Biotransformación biosintéticamente dirigida de precursores alcaloidales de Amaryllidaceae

MARCELA KURINA-SANZ; FLORENCIA CARMONA VIGLIANCO; ALEJANDRO A. ORDEN; EUGENIA GARCÍA BIASOTTI

Montevideo

Simposio; VII EnReBB (VII Encuentro Regional de Biocatálisis y Biotransformaciones), II SiLaBB (II Simposio Latinoamericano de Biocatálisis y Biotransformaciones); 2016

Universidad de la República

La familia Amaryllidaceae se conoce mundialmente tanto por su uso ornamentaldebido a la belleza de sus flores, como también por su utilización en la medicinatradicional [1]. Actualmente, esta familia está estrechamente relacionada aldescubrimiento de drogas de interés farmacológico, especialmente a partir de losgéneros Galanthus, Leucojum, Narcissus, Crinum, Lycoris, Clivia, Haemanthus,Pancratium e Hippeastrum. Los alcaloides de Amaryllidaceae (AA) comprenden másde 300 estructuras presentes exclusivamente en esta familia [2]. Dentro de los másimportantes y abundantes se encuentran licorina, tazetina, narciclacina, crinina,montanina y galantamina. En todos ellos se han reportados interesantes bioactividades, aunque sólo galantamina se comercializa actualmente para el tratamientopaliativo de la enfermedad de Alzheimer en sus estadios iniciales debido a sus efectosinhibidores de la enzima acetilcolinesterasa, de manera competitiva, reversible yselectiva. Todos estos alcaloides se originan en la planta a partir de tirosina y tienenun precursor común 4´-O-metilnorbeladina que, por reacciones de acoplamientofenólico oxidativo, da lugar a los diferentes esqueletos carbonados.A pesar de que algunos de estos compuestos han sido sintetizados exitosamente, suobtención a gran escala se realiza por extracción a partir del material vegetal, aunqueen muchas especies, la cantidad presente es muy baja.Con el objetivo de evaluar la incorporación del precursor común en las rutasbiosintéticas de estas plantas y aumentar la producción de sus alcaloides, éste fuesintetizado por condensación de tiramina e isovainillina (51% rendimiento) eincorporado a bulbos frescos de Crinum sp., los que fueron previamente desinfectadossuperficialmente y colocados en buffer fosfato a pH 6,00 y 8,00. Transcurrido 8 días,se realizaron extracciones con acetato de etilo y la fase orgánica fue analizada porcromatografía gaseosa acoplada a espectrometría de masas (GC-MS).Los ensayos se realizaron en dos épocas del año, a fines de la primavera y acomienzos del otoño. En este último caso, el análisis de los perfiles cromatográficosevidenció la presencia de 10 AA, tanto en blancos como en medios debiotransformación. Además, en este último medio apareció un compuesto adicionalidentificado como licorina. Por otro lado, en los ensayos realizados durante laprimavera, se observó un único pico correspondiente a acetato de crinina sólo en elmedio proveniente de los bulbos alimentados con el precursor a pH 6,00.