EVALUACIÓN DE LA VARIACIÓN EN LA EXPRESIÓN DE FACTORES DE VIRULENCIA IMPLICADOS EN LA PATOGENICIDAD DE Yersinia enterocolitica TRATADAS CON NANOPARTICULAS DE PLATA

ARACELI TORANZO; PAULINA L. PÁEZ; CECILIA LUCERO ESTRADA

Buenos Aires

Congreso; XIV CONGRESO ARGENTINO DE MICROBIOLOGÍA GENERAL - SAMIGE (XIV SAMIGE); 2019

Introducción y Objetivos: Yersinia enterocolitica está ampliamente distribuida en el medio ambiente y en laspoblaciones animales, lo que representa una fuente potencial de infección para los humanos. El principalreservorio de cepas patógenas para humanos es el cerdo. De entre los 6 biotipos conocidos, las cepas quepertenecen a los biotipos 1B y 2 a 5 son patógenas para animales y humanos. A pesar de no poseer losmarcadores de virulencia tradicionales, cepas del biotipo 1A han sido aisladas como único agente causal deinfecciones gastrotintestinales. La patogenicidad de Y. enterocolitica depende de la presencia de varios factoresde virulencia que facilitan que las bacterias ingresen a un organismo susceptible, lo colonicen, evadan elsistema inmunológico y crezcan en condiciones desfavorables. Previamente, observamos que nanopartículas deplata (NPsAg) fitosintetizadas con extracto acuoso de Bothriochloa laguroides tuvieron actividad antibacterianay antibiofilm contra cepas de Y. enterocolitica. Por lo tanto, el objetivo de este trabajo fue determinar si existevariación en la expresión de genes de virulencia.Materiales y Métodos: . Se utilizaron dos cepas de diferentes bio/serotipos: Y. enterocolitica 1B/O:8 (8081)e Y. enterocolitica 1A/O:5 (ME110). Los genes analizados para la cepa 8081 fueron virF ,ail ,inv , yenI e yst,mientras que para la cepa ME110 fueron yenI e yst debido a que los demás genes no se encuentran en estacepa.Las cepas se hicieron crecer en caldo tripticasa soja adicionado con 0,25% de glucosa (CTSG) por 24 h a25 °C con una dilución 1/256 de NPsAg, luego se procedió a realizar la extracción de ARN con Trizol. Se extrajoel ARN tanto de células planctónicas como sésiles. El ARN fue cuantificado a 260/280 nm. La síntesis de ADNcse llevó a cabo con 200 U/µl de la enzima retrotranscriptasa M-MLV.Para realizar la cuantificación relativa, laexpresión de los genes fue normalizada con el gen constitutivo 16S ARNr usando el software ImageJ 1.5.Resultados: Con la cepa 8081 se observó una disminución en la expresión del gen inv (que codifica para laproteína invasina, la cual promueve la adhesión) en células sésiles tratadas con NPsAg. Con la cepa ME110 nose observó variación en la expresión de los genes estudiados luego del tratamiento.Conclusiones: La disminución de la capacidad de formar biofilms de la cepa 8081 luego del tratamiento conNPsAg podría deberse a una disminución en la expresión de invasina, con la consiguiente disminución en laadhesión de las células.