MECANISMOS Y TERAPEUTICAS CONTRA GENOTOXICIDAD CAUSADA POR INFLAMACION NEUTROFILICA

LOPEZ CM; CHACON I DEL V; GOMEZ-MEJIBA SANDRA; BARRERA FS; RAMIREZ DARIO; CLAVELES CASAS, FN; DI SCIULLO, MARÍA PAULA

San Luis

Jornada; II Jornadas de Investigación e Intercambio en Salud de la Universidad Nacional de San Luis; 2019

La inflamación neutrófila es un mecanismo importante de daño oxidativo a las macromoléculas en los sitios de inflamación. Este proceso ocurre cuando los neutrófilos son retenidos y activados en sitios de irritación aguda como ocurre en la sepsis; o en sitios de inflamación crónica cuando los macrófagos se reactivan para expresar mieloperoxidasa (MPO). MPO es una de las proteínas principales en neutrófilos y también puede ser sintetizada por macrófagos en condiciones especiales. MPO es la única enzima de mamíferos que bajo condiciones fisiológicas puede sintetizar HOCl/-OCl. HOCl es un oxidante fuerte de dos y un electrón que puede oxidar macromoléculas por mecanismos mediados radicalarios o no radicalarios. Las células de tejido pueden tomar MPO del entorno extracelular. La MPO intracelular, en presencia de concentraciones fisiológicas de cloruro y H2O2, puede producir HOCl y causar genotoxicidad celular. La coincubación de células epiteliales pulmonares con neutrófilos humanos activados produce la acumulación de MPO dentro de las células epiteliales, un sistema que se asemeja a la inflamación neutrofilica en las vías respiratorias irritadas. En este caso tratamos de probar si la radicalización del ADN producida por HOCl producido intracelularmente puede causar mutacion del gen de hypoxanthine-guanine phosporibosyltransferase (hrpt) en A549 células epiteliales de las vías respiratorias y como el spin-trap 5,5-dimetil-1-pirrolina N-óxido (DMPO) puede modular este proceso. La exposición de células A549 cargadas con MPO activa y expuestas a una adición como bolus de H2O2, produjo HOCl dentro de ellas. El HOCl producido intracelularmente causó radicalización del ADN ,8-oxo-7,8-dihydro-2'?deoxyguanosine (8-oxo-dGuo), la translocación de p53 al nucleo y la mutacion del gen hrtp. La radicalización del ADN precede a la formación de 8-oxo-dGuo y la mutación del gen hrpt. El DMPO atrapó radicales centrados en el ADN, reducio la acumulación de 8-oxo-dGuo y bloqueo la mutacion del gen hrpt. El modelo in vivo del síndrome respiratorio agudo mostró acumulación y activación de neutrófilos pulmonares, radicalización del ADN y formación de 8-oxo-dGuo. Se discutirá el mecanismo y la terapia para reducir la acumulación/activación de neutrófilos y mutaciones mediadas por HOCl en sitios de inflamación neutrófila.