"Estudio teórico-experimental de nuevos inhibidores de la proteína quinasa BRAF"

YAMILA I RODRIGUEZ; JIRI KOSY; SERGIO E ALVAREZ; LUCIANA MORELLATTO RUGGIERI; MELINA G CASTRO; JOSEF JAMPILEK; LUDMILA E CAMPOS; FRANCISCO GARIBOTTO; DANIEL ENRIZ

Capital Federal (Buenos Aires)

Simposio; Simposio Internacional "Ganando la guerra contra el cáncer"; 2016

Alrededor  del  50%  de  los  pacientes  con  melanoma  expresan  la  proteína  quinasa  mutante BRAFV600E,  cuya  activación  constitutiva  induce  la  proliferación  a  través  de  la  activación  de  ERK. Vemurafenib  es  un  inhibidor  de  BRAF  que  se  utiliza  clínicamente  para  el  tratamiento  del melanoma metastásico  en  pacientes  BRAFV600E.  Considerando  que  la eficacia del  fármaco  es  limitada  por  el desarrollo  de  resistencia,  el  objetivo  de  este  trabajo  es  analizar  el  efecto  de  nuevos  compuestos  con potencial  actividad  inhibitoria  de  BRAF.  Los  nuevos compuestos  fueron  seleccionados  en  base  a  un estudio  de  modelado  molecular  de  BRAF  con  Vemurafenib,  en  el  cual  se  utilizaron  técnicas  de docking  combinadas  con  simulaciones  de  dinámica  molecular.  Para  el  estudio  experimental utilizamos  como  modelo  células  de  melanoma  Lu1205,  que  expresan  BRAFV600E,  y  se  analizó  la fosforilación  de  ERK  como  una  medida  de  la  actividad  de  BRAF.  Varios  compuestos  disminuyeron  la fosforilación  de  ERK  a  concentraciones  de  50  y  10 μM. Interesantemente,  derivados  6‐OH‐2‐carboxanilida  obtenidos  mediante  síntesis  química  fueron  los  compuestos  más  activos  presentando actividad  a  una  concentración  de  1 uM.  Resultados  preliminares  con  la  técnica  de  MTT  sugieren  que las  drogas  empleadas  a  10  uM  disminuyen  la  viabilidad  celular.  Teniendo en  cuenta  que  el tratamiento  de  las  células  Lu1205  con  Vemurafenib  por  2  horas  induce  reducción  en los niveles de pERK mientras que el tratamiento prolongado por 72 horas produce reactivación de la vía y aumento de  pERK,  estudios  adicionales  son  necesarios  para  determinar  si  los  compuestos  ensayados  se comportan en forma similar.