Múltiples mecanismos de acción del diterpeno 5-epi-icetexano sobre Trypanosoma cruzi.

LOZANO, E., CAZORLA, B., SARTOR, T., TONN, C., NIETO, M., GARCÍA, EE., SOSA, M.A., VEGA, I.

Coquimbo - Chile

Simposio; Simposio Internacional de la Enfermedad de Chagas. XII Jornadas Anuales de Parasitología; 2009

Sociedad Chilena de Parasitología

Trypanosoma cruzi es el agente etiológico causante de la enfermedad de Chagas. En cultivos este parásito cicla entre la forma epimastigote y un bajo porcentaje se diferencia a la forma infectiva tripomastigote. Derivados terpenoides han mostrado ser efectivas contra el parásito, aunque su uso todavía está restringido debido a algunos efectos citotóxicos sobre las células hospedadoras. Un  nuevo diterpenoide quinónico hidroxilado, 5-epi-icetexano (ICTX), ha sido purificado a partir de Salvia gilliesi, y mostro tener un efecto antiproliferativo sobre epimastigotes de T. cruzi, aun  a muy bajas concentraciones. Previamente observamos previamente que el crecimiento de los parásitos (Dm28c) sincronizados con hidroxiurea (HU) son arrestados selectivamente entre las 12 y 14 hs luego de la remoción de HU, mientras que no se observaron efectos aparentes en estadios más tempranos, correspondientes a la fase S del ciclo celular. Este estudio fue extendido a otras fases del ciclo celular. En contraste con los resultados previos, hemos observado que ICTX afecta la fase S, ya que la incorporación de H3 Timidina fue inhibida drásticamente por el compuesto. Además, por medio de microscopia electrónica, observamos que probablemente la fase M puede estar retardada de algún modo por acción del compuesto. Debido a que ICTX posee grupos quinónicos, un posible mecanismo de acción sería la producción de especies reactivas de oxigeno (ROS). Para determinar la producción de ROS utilizamos el método de la sonda 2’,7’-Diclocrofluorescein diacetato (H2DCFDA).  Por otra parte, durante la infección de células Vero con T. cruzi (cepa Y), puede observarse que a las 48 hs hay una disminución aproximada del 50% de células infectadas en presencia de bajas concentraciones de ICTX. A su vez, se observo una disminución en la liberación de parásitos al medio extracelular. Este bajo número de parásitos liberados podría deberse a que la droga ejerce un efecto antiproliferativo sobre los parásitos intracelulares, en correlación con la disminución de células infectadas.  A partir de estos resultados podríamos afirmar que ICTX afecta tanto a formas infectivas como no infectivas de T. cruzi por múltiples mecanismos, disminuyendo la sobrevida de los parásitos y la capacidad de invadir células de mamíferos.