Flujos iónicos y de agua intracelulares necesarios para la reacción acrosomal en espermatozoides humano.

DE BLAS, GERARDO A.; MICHAUT, MARCELA A.; SOSA, CLAUDIA; PAVAROTTI, MARTÍN; ARIAS, RODOLFO; POBLETE, SANTIAGO; JUSTRIBÓ, GISELLA

Mendoza

Jornada; XXV Jornadas de Investigación de la Universidad Nacional de Cuyo; 2018

Universidad Nacional de Cuyo

La reacción acrosomal (RA) es un evento exocítico del gránulo secretorio (acrosoma) ubicado en la zona apical de la cabeza del espermatozoide. Durante la exocitosis, se ha observado que el acrosoma sufre cambios morfológicos, siendouno de ellos el aumento de volumen. Nuestra hipótesis es que existen canales de cloro, potasio y agua presentes en el acrosoma del espermatozoide humano y los mismos son requeridos para la RA. Utilizamos espermatozoides humanos capacitados y permeabilizados con estreptolisina-O como estrategia para poder estudiar los canales intracelulares involucrados. En primer lugar, incubamos los espermatozoides permeabilizados con inhibidores de canales de agua(Hg2+, Ag+), cloro (DIDS, NPPB) y potasio (4AP, Apamina); por último, disparamos la RA con 10µM de calcio libre. Utilizando un quelante permeable de calcio y fotosensible (NP-EGTA), pudimos determinar el momento en el cual los flujos de iones y agua son requeridos durante la RA. Mediante inmunofluorescencia determinamos la presencia y localización de las acuaporinas y canales iónicos intracelulares. Observamos que los antagonistas de cloro, potasio y agua inhiben la RA y son requeridos en etapas tempranas de la misma. A su vez, observamos la presencia de acuaporina 7 y subunidades beta de canales de potasio dependientes de voltaje (Kvβ1) en la región acrosomal del espermatozoide humano. Nuestros resultados sugieren que canales de potasio, cloro y agua son requeridos para llevar acabo la RA.