IHEM   20887
INSTITUTO DE HISTOLOGIA Y EMBRIOLOGIA DE MENDOZA DR. MARIO H. BURGOS
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Espectrometría de masas aplicada a la identificación de enzimas digestivas un el molusco invasor Pomacea canaliculata
Autor/es:
ESCOBAR CORREAS, SOPHIA; VEGA, ISRAEL A; COLGRAVE, MICHELLE; MENDOZA PORRAS OMAR
Lugar:
Talca
Reunión:
Simposio; Primer Simposio Chileno de espectrometría de Masas; 2018
Resumen:
Pomacea canaliculata es un molusco nativo de Argentina que ha ganado notoriedad internacional por su alta capacidad invasiva de ecosistemas acuáticos (incluyendo áreas cultivadas) y por ser el vector del parásito Angiostrongyloides cantonensis, causante de la meningitis eosinófila en humanos. Es una especie voraz con diversas estrategias de alimentación. Aquí, investigamos el proteoma de tejidos y contenidos del tracto digestivo del animal mediante el uso combinado de espectrometría de masas y bioinformática. Específicamente buscamos identificar enzimas digestivas y sus lugares de síntesis y secreción. Se mantuvieron caracoles adultos (33-46 mm) en acuarios bajo condiciones controladas y con alimentación sincronizada por 48 h. Se homogenizaron los tejidos en buffer de extracción de proteínas (Tris-HCl 100 mM, pH 7,4, NaCl 10 mM, Triton X100 al 0,25%) y se prepararon las muestras con el método FASP (muestra Ayudada por filtro) para espectrometría de masas (MS). El análisis de MS se realizó en un 6600 Triple-TOF Spectral y las proteínas se identificaron utilizando el algoritmo Paragon integrado en el software ProteinPilotTM 5.0, la base de datos de Mollusca UniProt (versión 2017/06; 224,189 proteínas) y el transcriptoma de P. canaliculata. Identificamos 3.541 proteínas (≥ 95% de confianza) en la glándula digestiva, 2.517 en el intestino, y 3821 en la glándula salival. Además, encontramos 920 y 801 proteínas en los contenidos del buche y el saco de estilo, respectivamente. Entre un 5 y 24% de las proteínas encontradas en estos órganos participan en la digestión del alimento. Además, encontramos una amplia diversidad de glucosidasas y peptidasas a lo largo del tracto digestivo. Este estudio proporciona la base para evaluar estrategias biológicas de control o erradicación de esta especie invasora.