Estudio de la maquinaria molecular que participa en la interacción microorganismo patógeno célula hospedadora

BUONFIGLI, J.F.; DAMIANI, M.T.

Mnedoza

Seminario; Seminario Probiol; 2017

Probiol

            Chlamydiatrachomatis es un patógeno intracelular obligado que sobrevive y semultiplica en un fagosoma modificado llamado ?inclusión?. Esta bacteria alterael transporte intracelular para evitar su degradación en lisosomas y paraderivar a la inclusión vesículas ricas en lípidos necesarios para sureplicación. Para ello, excluye tempranamente de su membrana Rabs típicas de lavía endo/fagocítica como Rab5 y Rab7; y se enriquece en Rabs relacionadas con lavía de reciclaje y la ruta biosintética como Rab6, Rab11, Rab14 y Rab39. LasGTPasas Rab controlan el tráfico de membranas mediante la interacción conproteínas específicas como Rab6 interacting protein 1 (R6IP1), que es unefector múltiple de estas Rabs. Este trabajo de tesis propone el desarrollo yperfeccionamiento de técnicas de procesamiento de imágenes y videos obtenidosmediante microscopía de fluorescencia para estudiar el rol de estas proteínasreguladoras del transporte en el curso de la infección clamidial. Se ha  desarrollado un plug-in que analiza elmovimiento vesicular en tiempo real, y la interacción con la membrana de lainclusión clamidial. Dicha aplicación muestra tanto la cantidad de eventos defusión y de fisión entre las vesículas enriquecidas con la Rab de interés y lainclusión clamidial, como los sectores de la inclusión y el instante en el quedichos eventos ocurren. También se ha desarrollado una aplicación para medir múltiplecorrelación entre moléculas marcadas. Dicha aplicación utiliza herramientasdesarrolladas para estudios de colocalización y simulaciones para abordar elcaso específico de triple correlación, y permite analizar la concurrencia delas Rabs en estudio y sus interactores en la inclusión clamidial y en distintasorganelas subcelulares.