Compartimentos endocíticos: nichos de replicación del Virus de la Bursitis Infecciosa Aviar

DELGUI, LAURA R.

Buenos Aires

Congreso; XII Congreso Argentino de Virología (XII CAV); 2017

Comisión organizadora del XII CAV

Los virus con genomas constituidos por ARN replican en el citoplasma de las células infectadas. Este genoma puede encontrarse ya sea como ARN de cadena simple positiva o negativa (+ARNs o -ARNs, respectivamente) o como ARN de doble cadena (ARNdc). Aunque estas variantes están asociadas con distintas estrategias de replicación y transcripción, dicha replicación implica la generación de moléculas de ARNdc como productos intermedios, que representan una gran amenaza para la célula hospedadora, la cual responde a su vez induciendo una respuesta inmune innata antiviral.El Virus de la Bursitis Infecciosa Aviar (IBDV), el miembro mejor caracterizado de la familia de Birnaviridae, es un Avibirnavirus distribuido en el mundo, causante dela enfermedad de Gumboro, una afección inmunosupresora en pollos con importantes consecuencias para la población de aves. Estructuralmente, los viriones de IBDV son cápsides icosaédricas no envueltas de ~70 nm de diámetro, formadas por disposiciones pentaméricas y hexaméricas de una única proteína, la proteína VP2. Los viriones pertenecientes a la familia Birnaviridae carecen del ?core? estructuralmente conservado en todos los virus ARNdc. En cambio, su ARN genómico está integrado en un complejo ribonucleoproteico (RNP), transcripcionalmente activo, constituido por el ARNdc, la ARN-polimerasa ARN-dependiente (RdRp), VP1 y la proteína multifuncional, VP3. Estudios llevados a cabo en nuestro laboratorio demuestran que luego de la adsorción y el reconocimiento por parte de los receptores celulares, los viriones emplean la vía macropinocítica para ser internalizados en la célula hospedadora y llegar hasta compartimentos endosomales. Analizando la localización subcelular de componentes de los complejos de replicación de IBDV (RNPs), demostramos que la replicación de IBDV se produce asociada a la membrana endosomal. Hemos observado que, luego del desensambe de la cápside viral en los endosomas, VP2 continúa su tránsito por la vía endocítica hasta su degradación lisosomal, mientras que las RNPs, vía VP3, se asocian a fosfolípidos en las membranas endocíticas generadas en la célula infectada. Además, identificamos la topología de la asociación VP3-membrana endosomal y el dominio de aminoácidos de VP3 implicados en esta asociación, demostrando su papel funcional crítico en el contexto del ciclo de vida del virus.Estos resultados constituyen las primeras evidencias experimentales directas que demuestran que un compartimiento membranoso, como son los endosomas, son requeridos por un virus de ARNdc para generar sus nichos de replicación, posiblemente como estrategia para evadir la respuesta inmune innata antiviral.