Caracterización Funcional de la Proteína Vpu del Virus de la Inmunodeficiencia Humana 1 (HIV-1)

AYMÉ DRAKE; LUCIANA MORELLATTO RUGGIERI; JAVIER G. MAGADAN

Buenos Aires

Congreso; XII Congreso Argentino de Virología; 2017

Asociación Argentina de Microbiología

Para infectar a un nuevo hospedador, replicar en él por muchos años y propagarse a otros individuos, el HIV-1 (Human Immunodeficiency Virus-1) debe eludir no sólo a las defensas innatas, que incluyen a los llamados "factores antivirales de restricción", sino también a las defensas adaptativas humorales y celulares antígeno-específicas. Hasta el día de hoy, se han identificado numerosos factores de restricción que actúan activamente contra este importante patógeno humano (APOBEC3G, TRIM5a, cyclophilin A, BST-2/tetherin, SAMHD1 y SERINC3/5), por lo que no es sorprendente que el HIV-1 haya evolucionado numerosos mecanismos para evadir a estos factores, ya sea adquiriendo mutaciones en las proteínas virales susceptibles a su accionar o codificando proteínas específicas que logran neutralizarlos. Entre estas últimas, conocidas como "proteínas virales accesorias" se encuentra Vpu, la cual funciona como un adaptador molecular conectando a sus blancos celulares específicos con vías proteolíticas o rutas alternativas de tráfico intracelular. Así, Vpu promueve el "downregulation" del propio receptor viral CD4 y del factor de restricción BST-2/tetherin a través de mecanismos celulares que están lejos de entenderse en su totalidad. Con el fin de caracterizarlos a nivel molecular obtuvimos un perfil proteómico completo de las proteínas humanas que interactúan específicamente con Vpu tipo salvaje y con versiones mutantes bien caracterizadas, tal como es el caso de Vpu-VSV-G-TMD, una proteína quimérica a la que le hemos reemplazado el dominio transmembrana (TMD) de Vpu por aquel de la proteína G del virus VSV (Vesicular Stomatitis Virus). Esta proteína Vpu mutante es incapaz de 1) interactuar eficientemente con CD4 y, en consecuencia, 2) pierde la capacidad de inducir su degradación a través de la vía proteolítica ERAD (Endoplasmic Reticulum (ER)-Associated Degradation). De esta manera, razonamos que el TMD de Vpu exhibe ciertos motivos estructurales (Trp22 y Ser23, sólo por citar algunos) que mediarían su interacción con factores celulares transmembrana críticos para el mecanismo de "downregulation" del CD4 y BST-2, entre otros blancos específicos de Vpu. Así, y en línea con nuestra hipótesis original, identificamos diversas proteínas transmembrana como nuevos factores celulares que interaccionan específicamente con Vpu tipo salvaje pero no lo hacen con Vpu-VSV-G-TMD, las cuales representarían serios candidatos a participar en los complejos mecanismos celulares por los que Vpu ejerce sus numerosas funciones