Compensación Funcional de Glicoproteínas en el Virus Influenza A

JACK R. BENNINK; LUCIANA MORELLATTO RUGGIERI; JAVIER G. MAGADAN; AYMÉ DRAKE; JONATHAN W. YEWDELL

Buenos Aires

Congreso; XII Congreso Argentino de Virología; 2017

Asociación Argentina de Microbiología

La gripe es una infección aguda de las vías respiratorias causada principalmente por el virus influenza A (IAV). Este importante patógeno humano es capaz de ocasionar no sólo epidemias anuales sino también pandemias globales con un gran impacto económico, social y sanitario. La continua amenaza que supone el IAV sobre la población humana se debe a su habilidad para escapar de la respuesta inmune humoral desarrollada por el organismo hospedador infectado, al adquirir mutaciones en dos glicoproteínas de la superficie viral, hemaglutinina (HA) y neuraminidasa (NA). Este fenómeno, conocido como "drift antigénico", permite al IAV evadir así condiciones adversas que podrían afectar su adecuada replicación y propagación, tales como anticuerpos anti-influenza y diversas terapias antivirales. Si bien estas mutaciones son generalmente beneficiosas para el progreso del ciclo infeccioso viral, ocasionalmente pueden afectar también la función de HA o NA. Debido a que estas glicoproteínas poseen funciones completamente opuestas (ingreso y salida del IAV hacia y desde la célula hospedadora, respectivamente), el virus incorpora frecuentemente nuevas mutaciones secundarias o "compensatorias" en una u otra proteína con el fin de mantener en equilibrio el delicado balance funcional entre HA y NA. Con el fin de identificar y caracterizar las bases celulares y moleculares de este fenómeno, evaluamos en primera instancia el impacto de tales mutaciones sobre la función de NA en cinco IAVs H1N1 A/Puerto Rico/8/34 (PR8) mutantes "compensados" que logramos aislar in vitro como consecuencia de su "escape" a anticuerpos neutralizantes anti-HA. Nuestros resultados indican que ciertas variaciones antigénicas y funcionales en HA conducen a la incorporación de mutaciones en NA que reducen significativamente su actividad enzimática por virión. Tal fenotipo se debería a una deficiente incorporación de NA a la membrana plasmática de la célula hospedadora, ya que estas mutaciones afectan no solo la estabilidad conformacional de NA sino también su tráfico desde el retículo endoplasmático a la superficie celular. Así, la utilización de estos IAVs mutantes, en combinación con técnicas bioquímicas de avanzada y microscopía de inmunofluorescencia confocal, nos permite estudiar en detalle los complejos mecanismos que conducen a la retención intracelular de NA bajo estas condiciones experimentales, lo cual nos ayudará a comprender el fenómeno general de ?compensación? en los virus de la gripe desde una perspectiva celular y molecular. La caracterización de las vías y factores celulares implicados en la maduración y el tráfico de NA ofrecerá, además, una excelente oportunidad para descubrir posibles blancos terapéuticos