Rol de Munc18-1 en la reaccion acrosomal de espermatozoides humanos

RODRIGUEZ AYALA, JF; TOMES, CN

Chillán, Chile

Congreso; XIX Reunion anual de la Sociedad Chilena de Reproduccion y Desarrollo; 2008

Sociedad Chilena de Reproduccion y Desarrollo

La reacción acrosomal (RA) es un tipo de exocitosis regulada que le permite al espermatozoide penetrar la zona pelúcida del ovocito. Munc18-1 es una proteína esencial para la exocitosis, sin embargo, su rol es controvertido. Un modelo propone que une y secuestra a sintaxina-1 en su conformación “cerrada”, lo cual inhibiría la exocitosis. Otro modelo propone que Munc18-1 promueve y acelera la formación de complejos SNAREs. Previamente hemos demostrado su presencia y localización por medio de Western blot e inmunofluorescencia indirecta, así como su requerimiento en etapas posteriores al tethering dependiente de Rab3A y previo a la salida de calcio acrosomal. Nuestros objetivos fueron estudiar la función de la proteína endógena y el mecanismo por el cual la proteína recombinante es inhibitoria. Mediante el uso de ensayos funcionales en un modelo de espermatozoides humanos permeabilizados con estreptolisina O establecimos que la proteína endógena actuaría regulando el ensamble de las SNAREs. Gracias a la utilización de tres estrategias diferentes demostramos que la proteína recombinante  posee un rol inhibitoria en la RA, ya que secuestra a sintaxina-1 en su conformación monomérica. Por lo tanto concluímos que Munc18-1 está presente en espermatozoides humanos, posee localización en la región acrosomal, actúa en etapas posteriores al tethering mediado por Rab3A y previo a la salida de calcio acrosomal.