IHEM   20887
INSTITUTO DE HISTOLOGIA Y EMBRIOLOGIA DE MENDOZA DR. MARIO H. BURGOS
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
La autofagia en la nefropatía diabética: Alteraciones relacionadas al túbulo proximal en ratones con diabetes mellitus tipo 2.
Autor/es:
EZQUER, ME; GIRAUD BILLOUD, M.; FADER-KAISER, C; AGÜERO, R
Lugar:
Mendoza
Reunión:
Jornada; I Jornada de investigación del instituto de endocrinología metabolismo y nutrición; 2016
Institución organizadora:
Instituto de endocrinología metabolismo y nutrición, FCM, UNCuyo
Resumen:
Introducción: La autofagia es un proceso celular homeostático que le permite a la célula degradar y reciclar componentes celulares dañados como organelas y proteínas. Un desbalance en el proceso de autofagia se ha visto relacionado a la patogénesis de la nefropatía diabética, describiéndose en estudios preclínicos su inhibición en modelos animales de DMT1 y DMT2, pero no se conoce el rol que pueda tener en la afectación del transporte de proteínas tubulares.Objetivo: En este estudio evaluamos el rol de la autofagia en etapas tempranas de la nefropatía diabética inducida por DMT2 y su posible asociación con la afectación de la reabsorción tubular de proteínas. Materiales y Métodos: Animales C57BKSdb+/- y C57BKSdb/db machos fueron alimentados de manera irrestricta con alimento estándar para roedores. Los animales C57BKSdb/db son mutantes homocigotas con deficiencia del gen de leptina que confiere susceptibilidad a obesidad e insulino-resistencia y presentan albuminuria, daño histológico y reducción de la función renal a las 32 semanas de vida. Estos animales fueron divididos en animales controles (C57BKSdb+/-) y diabéticos (T2DM). Cada 2 semanas se realizaron recolecciones de muestras de orina y determinaciones bioquímicas y físicas. Cuando los animales se eutanasiaron (32 semanas de vida) se obtuvieron muestras de plasma y de los riñones, y se determinaron: insulina, niveles urinarios de enzimas marcadoras de daño del túbulo proximal (GGT y ALP), de proteína transportadora de vitamina D; mientras que en muestras tisulares se evaluaron alteraciones ultraestructurales del túbulo proximal, el grado de fibrosis intersticial, la cantidad de vesículas de autofagia en las células tubulares y la expresión de marcadores de autofagia (LBPA, LC3 y p62), junto a de los transportadores de albúmina megalina y cubilina.Resultados: Los animales con DMT2 presentaron albúmina y presencia de marcadores de daño celular tubular en la orina (GGT y ALP), sin embargo no se evidenció un aumento significativo del grado de fibrosis túbulo-intersticial ni alteraciones en la membrana basal de las células del túbulo proximal. En la evaluación de la autofagia y su relación con los transportadores de albúmina observamos que los túbulos proximales de animales DMT2 mostraban un incremento de la cantidad de vesículas de autofagia marcadas por inmunofluorescencia (LBPA), mientras que megalina y cubilina no evidenciaban afectación en su localización a nivel de luz tubular. Sin embargo, la expresión (WB) de megalina estaba significativamente disminuida en comparación con el grupo control. La cuantificación del número de vesículas autofágicas y el porcentaje de área citoplasmático que ocupaban en las células tubulares no mostró diferencias entre los grupos experimentales, mientras que la expresión de LC3, la formación de la forma LC3II y la expresión de p62 fueron significativamente mayores en animales del grupo control.Conclusión: La interpretación de los resultados obtenidos indica que durante la fase inicial de la nefropatía diabética por DMT2, mecanismos asociados a un desbalance en la autofagia tubular podrían estar relacionados a la disminución de la reabsorción de albúmina tubular por afectación del reciclado y síntesis de transportadores. Estudios ulteriores relacionados a evaluar si el desbalance de la autofagia es el causante del problema o su falla induce un aumento de la apoptosis tubular, podrán aclarar su rol en la patogénesis de la enfermedad.