Influencia de la vía de señalización de ROCK en la internalización de Coxiella burnetii

DISTEL, JESUS SEBASTIAN; ORTIZ FLORES, RODOLFO MATIAS ; BERÓN, WALTER

Mendoza

Jornada; XXIV Jornadas de Investigación y VI Jornadas de Posgrado Universidad Nacional de Cuyo; 2015

SeCTyP-UN de Cuyo

Coxiella burnetii (Cb) es un patógeno intracelular obligado agente causal de la fiebre Q. La fagocitosis es un importante mecanismo de defensa del hospedador contra el patógeno donde participa actina y proteínas relacionadas. Nuestro objetivo es estudiar el rol de ROCK y sus efectores: ezrina, LIMK 2 y miosina II no muscular (NM II) en la fagocitosis de Cb. Células HeLa fueron transfectadas con siRNA contra Ezrin, o con pEGFP-Ezrin WT, T567D, pHA-LIMK 2 WT, TA, TEE e infectadas con Cb. Luego de 6h, fueron procesadas para inmunofluorescencia indirecta y analizadas por microscopía confocal. Observamos una disminución en la internalización de Cb cuando se depletó ezrina a partir de siRNA. El tratamiento con Y27632 (inhibidor de ROCK) disminuyó el ingreso de Cb sin embargo la sobreexpresión de ezrina (T567D) recobró parcialmente la condición control. Al sobreexpresar LIMK 2 WT o sus mutantes no fue afectada la entrada de Cb. Finalmente, al incubar células HeLa con blebistatina (inhibidor de NM II) encontramos un menor porcentaje de internalización de Cb. Los resultados sugieren que ROCK y sus efectores: ezrina y NM II participan en la internalización de Cb en células no fagocíticas.