Comparación de dos métodos de tinción para detectar la reacción acrosomal en espermatozoides humanos

MARIA L FORNES; LEONARDO PELLETAN; CLAUDIA M SOSA; RODOLFO J ARIAS; SANTIAGO POBLETE; BELMONTE SA; GERARDO A DE BLAS

Mendoza

Jornada; XXIV Jornadas de Investigación y VI Jornadas de Posgrado Universidad Nacional de Cuyo; 2015

Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Medicina

La reacción acrosomal (RA) es un evento exocítico calcio dependiente que permite al espermatozoide fecundar al ovocito. Muchos métodos se han descripto para detectar el estado acrosomal de los espermatozoides. Estas técnicas son en general complicadas, costosas y se pueden utilizar en pocas especies. El objetivo del presente estudio fue determinar la sensibilidad y especificidad del azul de Coomassie (AC) y correlacionar los resultados con la tinción de referencia, la lectina Pisum sativum aglutinina conjugada con isotiocianato de fluoresceína (PSA-FITC). Se utilizaron muestras de pacientes normales y muestras criopreservadas. Los espermatozoides humanos capacitados se incubaron en ausencia (control) o en presencia de agonistas de la RA (A23187 y Pg) durante 30 minutos, luego se tiñeron con los dos colorantes y se evaluó el estado acrosomal por microscopía de fluorescencia (PSA-FITC) y de campo claro (AC). Los estudios mostraron que los dos métodos presentaron resultados similares de RA. Podemos concluir que el AC es una tinciónrápida, de bajo costo y reproducible, lo que permite su uso en laboratorios bioquímicos de baja complejidad.