Cloruro de amonio induce cambios en la expresión y distribución de proteínas en células tumorales

BANNOUD N; CARVELLI L,; VARGAS-ROIG L; SOSA M

Mar del Plata

Congreso; LX Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2015

Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC)

Lasecreción aberrante de hidrolasas lisosomales, tal como procatepsina D(proCatD), es un cambio fenotípico común en muchos cánceres humanos. Eltransporte de esta enzima a lisosomas es mediado por receptores a manosa-6-P(MPRs), sortilina o vías alternativas. Se han descripto dos formas de MPRs:catión-dependiente (CD-MPR) y catión-independiente (CI-MPR), de los cuales elCD-MPR participaría en la exocitosis de enzimas lisosomales. En células detumores mamarios malignos se desconoce aún el mecanismo de secreción de CatD almedio extracelular. Algunos autores lo atribuyen a un defecto en laacidificación de compartimientos (Kokkonen 2004). En base a estas hipótesis, estudiamosel efecto del cloruro de amonio(una amina acidotrópica que impide la correctaacidificación de compartimientos intracelulares), sobre la expresión ydistribución de los receptores que podrían estar involucrados en el transporteintracelular de la enzima en la línea celular MCF-7 (derivada de adenocarcinomaductal mamario, que expresa  receptores deestrógeno). Mediante inmunoblot  einmunofluorescencia indirecta, observamos que el tratamiento con cloruro de amonio durante 6, 12, 18 y24 h aumenta la expresión intracelular de la forma inmadura de catepsina D encélulas MCF-7,, indicando que la misma no es procesada en lisosomas. A su vez, laamina induce un aumento en  la expresióndel CD-MPR  y una disminución desortilina. El primer efecto podría atribuirse a un bloqueo en el reciclaje delreceptor desde un compartimiento acídico al aparato de Golgi, mientras que elsegundo efecto podría deberse a que la alcalinización de los compartimientos induzcala secreción de exosomas y consecuentemente la liberación de sortilina al medioextracelular, tal como lo han propuesto otros autores (Wilson 2014). Estosresultados sugieren que: el transporte intracelular de CatD es mediado porreceptores en células MCF-7, y que su secreción no se debe a un defecto enla  acidificación de compartimientos enesta línea celular.