Arf6 regula la fusión de membranas en la exocitosis acrosomal de espermatozoides humanos

PELLETÁN LEONARDO; LÓPEZ CECILIA; SUHAIMAN LAILA; ROGGERO MARCELO; MAYORGA LUIS; BELMONTE SILVIA

Facultad de Ciencias Médicas, Universidad Nacional de Cuyo, Mendoza.

Jornada; X XI JORNADAS DE INVESTIGACIÓN Y III JORNADAS DE POSGRADO DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE CUYO; 2008

Universidad Nacional de Cuyo

La cabeza del espermatozoide contiene una vesícula secretoria denominada acrosoma. La fusión de la membrana plasmática con la acrosomal es una exocitosis regulada por calcio denominada reacción acrosomal (RA). Nuestro objetivo fue determinar el rol de Arf6 en la RA y elucidar la secuencia de reacciones en las que interviene. Durante la RA se produce  fosfatidilinositol 4,5-bifosfato (PIP2) y ácido fosfatídico (PA). Utilizando Western blot e inmunofluorescencia determinamos que Arf6 está presente en espermatozoides humanos y se localiza en la región acrosomal. Ensayos funcionales demostraron que la GTPasa Arf6, miristoilada y activada con GTP, indujo RA en espermatozoides permeabilizados en forma  independiente del calcio citosólico y dependiente del calcio acrosomal. Arf6 no miristoilada o cargada con GDP no indujo RA indicando que la miristoilación y la activación son necesarias para la RA. La RA fue inhibida por antiPLD1, butan1ol y se recuperó con PA. El dominio PH de PLC (une PIP2) inhibió la RA. Ambos resultados indican que la exocitosis disparada por Arf6 necesita la activación de PLD1 y la presencia de PIP2. Estos resultados sugieren que Arf6 regularía la función de PLD1, la producción de PIP2 y constituyen la primera evidencia de su presencia y función en espermatozoides humanos