Distribución subcelular de proteínas Rab relacionadas con las vías endocíticas y biosintética

CAPMANY A; PAVAROTTI M; LEIVA N; MAGADÁN J; MAYORGA L; DAMIANI MT

Universidad Nacional de Cuyo.Facultad de Ciencias Médicas.Mendoza.Argentina

Jornada; IX Jornadas de Investigacion de la Secretaría de Ciencias, Técnicas y Postgrado; 2007

Secretaría de Ciencias, técnica y Postgrado. Universidad Nacional de Cuyo.

Las proteínas Rab constituyen la familia más numerosa de Ras-related GTPasas de bajo peso molecular. Actúan como interruptores moleculares que ciclan entre un estado inactivo (unido a GDP) y un estado activo (unido a GTP). Se asocian a las membranas a través de un grupo geranilgeranilo unido a las Cisteinas presentes en su extremo C-terminal. Las proteínas Rabs activas forman plataformas moleculares capaces de reclutar distintos efectores a las membranas. Se han descripto más de 60 Rabs diferentes y todas tienen un rol clave en la regulación del tráfico intracelular. Las Rabs participan en la formación de vesículas, su transporte mediante la asociación a proteínas del citoesqueleto, y su direccionamiento y fusión con compartimientos específicos intracelulares. Se conoce la localización y función de algunas Rabs en la vía endocítica y secretoria, pero es muy limitado el conocimiento acerca de la manera en que estas proteínas se relacionan entre sí para regular el tráfico intracelular. Nuestro objetivo es analizar la distribución intracelular y posible relación entre Rab14 y Rab22. Rab14 funciona en la vía endocítica y biosintética (ER, Golgi, and TGN). Rab22 afecta la morfología y función de la vía endocítica y de reciclaje. Para analizar su localización intracelular por microscopía confocal, se sobreexpresarán estas GTPasas salvajes y formas mutantes activas e inactivas fusionadas a proteínas fluorescentes. Rab14 y Rab22 presentan un patrón puntiforme-vesicular distribuido por todo el citoplasma con cierta concentración de Rab14 en la zona perinuclear. Las imágenes obtenidas muestran un elevado grado de co-localización entre ambas proteínas. Nuestros resultados indican que existe una relación entre ambas Rabs, ya que la utilización de formas mutantes de una Rab, altera la distribución y el compartimiento intracelular en donde se concentra la otra proteína Rab. Las Rabs, controlando el transporte vectorial de proteínas y membranas entre las distintas organelas, aseguran el mantenimiento de la identidad intracelular.