Metilación frecuente del gen WT1 en carcinomas mamarios de la provincia de Mendoza.

LAURITO SERGIO; CAMPOY, EMANUEL; BRANHAM MARIA T; URRUTIA GUILLERMO; GAGO FRANCISCO; OROZCO JAVIER; TELLO OLGA; ROQUÉ MARIA

Jornada; XII Jornadas de Mastología; 2014

Introducción El epigenoma del cáncer se caracteriza por una hipo-metilación global del genoma y una híper-metilación de sitios CpG, que pueden provocar el silenciamiento de genes relacionados con cáncer. Un rasgo distintivo de las alteraciones epigenéticas es que son consideradas influenciables por factores ambientales como estilo de vida y nutrición. Objetivos  El objetivo de nuestra investigación es estudiar la metilación aberrante en carcinomas mamarios de la región de Mendoza, detectar su efecto sobre la expresión génica e identificar posibles marcadores epigenéticos específicos de procesos tumorigénicos locales.   Materiales y Métodos 97 pacientes han sido incluidas a la fecha, firmando un consentimiento informado aprobado por el comité de Ética de la Facultad de Cs Médicas de la UNCuyo. Para los  análisis de metilación se utilizó la metodología Methyl-Specific-Multiplex-Ligation-Probe-Amplification. Se analizaron 84 sitios CpG localizados en 41 genes relacionados con cáncer, en 97 tumores frescos de diferentes estadios y 30 márgenes de resección quirúrgica. A su vez, se realizaron los mismo análisis sobre ADN de 3 líneas celulares de cáncer de mama. Para análisis de expresión génica se realizaron ensayos de qPCR sobre ARN obtenido de líneas celulares. Para análisis estadísticos se utilizó el programa SPSSv17.5 Resultados Todos los tumores analizados presentaron metilación aberrante en distintos sitios CpG. Sorprendentemente, detectamos que un sitio a -412pb del inicio de transcripción del gen WT1, se encuentra metilado en 90/97 tumores (92,8%). Confirmamos que esta alteración es específica del tumor (p˂0.0001) y está presente en tumores de todos los estadios. Finalmente, los ensayos de expresión en líneas celulares revelaron que esta metilación silencia la expresión del gen. Conclusión La metilación del CpG -412 WT1 ha sido reportada en otros tumores y en cáncer de mama, pero hasta nuestro conocimiento nunca con una frecuencia tan alta. Siendo una marca epigenética tan prevalente, tumor específica, y de aparición temprana, permite postularla como posible marcador epigenético.