MICRODOMINIOS DE MEMBRANA EN OVOCITOS DE HAMSTER

BOARELLI P V; DE ROSAS J C; FORNES M W

Huerta Grande - Córdoba

Congreso; 1ra Reunión Conjunta de Sociedades de Biología de la Republica Argentina; 2007

Sociedades de Biología de la República Argentina, Cuyo, Córdoba, Tucuman, Rosario y Bs. As.

MICRODOMINIOS DE MEMBRANA EN OVOCITOS DE HAMSTER   Boarelli P, De Rosas JC, Fornes M LIAM – IHEM – Fac. Cs. Médicas – UNCuyo – CONICET pvboarelli@yahoo.com.ar   Los microdominios de membrana (MD) son estructuras que constituyen “parches” y tienen funciones específicas. Los principales componentes de estos MD son colesterol (Co), glicoesfingolípidos (GM1) y proteínas asociadas. Nuestro trabajo tiene como objetivo localizar los lipídos de los MD en ovocitos de hamster. Hembras de 6 – 8 semanas fueron inyectadas con eCG y 48 horas después con hCG, para superovulación. Los ovocitos (O) recuperados 12 hs post hCG fueron tratados con hialuronidasa y con marcadores específicos para Co (Filipin III: FIII) y GM1 (Toxina Colérica Sub-beta: CTB) secuencialmente (experimental). Los O fueron separados en cuatro grupos: Control (C) 1 sin ZP y 2 con ZP; Experimental (E) 1 sin ZP y 2 con ZP. Para eliminar la ZP se uso tripsina. FIII es autofluorescente y CTB está conjugado con Alexa Fluor 594. Esto permite su observación por microscopía de fluorescencia. En los O experimentales se observa una señal de fluorescencia localizada en la superficie de la membrana tanto en E1 y E2, tanto para Co (FIII) y GM1 (CTB). ZP no presenta fluorescencia por su naturaleza química, lo cual indica especificidad en la señal. Estos resultados son concordantes con trabajos realizados en ratón, donde están los MD y tienen implicancia en la fertilización.