Gen plastídico rRNA 16S y transmisión maternal de un endosimbionte en el caracol manzana Pomacea canaliculata

DELLAGNOLLA, FEDERICO; KOCH, EDUARDO; CASTRO-VAZQUEZ A.; VEGA, I.A.

La Plata

Congreso; Congreso Argentino de Malacología; 2013

Pomacea canaliculata (Lamarck, 1822) es un ampulárido que hospeda dos morfotipos (?C? y ?K?), de un simbionte en células específicas de la glándula digestiva. El simbionte es encontrado además en el ambiente extracelular (conductos glandulares, estómago e intestino) y es eliminado en las heces permaneciendo varios años en los sedimentos de los acuarios. En este trabajo estudiamos a nivel molecular y filogenético el gen que codifica el RNA ribosomal 16S (rRNA 16S) y evaluamos el posible modo de transmisión del endosimbionte (vertical versus horizontal) en la población del huésped. Nosotros identificamos ambos morfotipos del simbionte en la glándula digestiva (hibridación in situ) usando sondas que reconocen regiones conservados específicas del gen rRNA 16S para Bacteria y Cyanobacteria. Este gen fue además amplificado y secuenciado usando como molde el ADN extraído del morfotipo ?C? del simbionte. Para la reconstrucción de las relaciones filogenéticas, utilizamos secuencias representativas del gen rRNA 16S de los mayores Phyla bacterianos (incluyendo a Cyanobacteria) y plástidos de Glaucophyta, Rhodophyta, y Viridiplantae. El árbol de máxima verosimilitud mostró que la secuencia del simbionte es soportada dentro de un grupo monofilético que incluye a todas las cianobacterias y plástidos, mostrando mayor afinidad con los cloroplastos de plantas. Para testear el modo de transmisión del simbionte diseñamos un experimento que bloqueó la adquisición del mismo desde el ambiente (transmisión horizontal). Obtuvimos asépticamente juveniles previos a su eclosión y fueron mantenidos por 7 días (grupo experimental) en un medio nutritivo estéril; este día post-eclosión se corresponde con la aparición morfológica del simbionte en la glándula digestiva de animales criados en acuarios (grupo control). En ambos grupos, experimental y control, se observó el simbionte en la glándula digestiva de los juveniles. Asimismo, identificamos en huevos recién puestos una secuencia del gen rRNA 16S del simbionte (similar a la observada en animales adultos) apoyando la transmisión vertical del mismo. En su conjunto, estos resultados sugieren que el gen rRNA 16S plastídico se adquirió por transferencia lateral o alternativamente que este simbionte podría ser un ancestro aún desconocido de los cloroplastos.