IHEM   20887
INSTITUTO DE HISTOLOGIA Y EMBRIOLOGIA DE MENDOZA DR. MARIO H. BURGOS
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Identificación Molecular y Análisis de Localización de las Isoformas de SNAP y NSF Durante la Maduración y Activación Ovocitaria
Autor/es:
DE PAOLA, MARIA MATILDE; CAPPA, ANDREA ISABEL; GALLO, GIOVANNA LUCRECIA; MICHAUT, MARCELA ALEJANDRA
Lugar:
Mendoza
Reunión:
Jornada; XXIII Jornadas de Investigación y V Jornadas de Posgrado de la Universidad Nacional De Cuyo; 2013
Institución organizadora:
UNIVERSIDAD NACIONAL DE CUYO
Resumen:
El mecanismo molecular de la exocitosis de gránulos corticales (EGC) no ha sido dilucidado, y sólo se conocen 4 proteínas asociadas al mismo en ovocito de ratón: Rab3A, Sintaxina 4, Rabfilina 3 y SNAP-25. Nuestra hipótesis general es que la fusión de membranas durante la EGC comparte la maquinaria proteica con otras exocitosis conocidas, como la exocitosis neuronal y acrosomal. Las SNAPs son proteínas que desempeñan un rol clave en la fusión de membranas. En mamíferos se han descripto 3 isoformas: α, β y ɣ. Los ratones hyh presentan una mutación puntual en el gen de α SNAP, y además de tener problemas neurológicos , son infértiles. La infertilidad de los machos hyh se debe a que la proteína α SNAP mutada altera la exocitosis acrosomal. Sin embargo, se desconoce la causa de la infertilidad de las hembras hyh y, aún más, se desconoce qué isoforma de SNAP se expresa en ovocito. Con el objetivo de identificar las isoformas de SNAP presentes en ovocito de ratón se realizó RT-PCR y se analizó la expresión y la localización durante la maduración por western blot e inmunofluorescencia indirecta. Los resultados muestran que sólo α y ɣ SNAP están presentes, no habiendo diferencias significativas en los niveles de expresión de α y ɣ SNAP en los distintos estadíos de maduración analizados. La localización de α y ɣ SNAP es principalmente cortical, observándose mayor distribución citosólica de ɣ SNAP en estadíos inmaduros. Estos resultados apoyan nuestra hipótesis general.