Estado tiol de proteínas flagelares espermáticas y su relación con la movilidad de espermatozoides humanos. Diferencias entre muestras normozoospérmicas y astenozoospérmicas

CABRILLANA ME; RUIZ ESTRABON MARTIN; GUERRI MB; MONCLUS M. DE LOS A; SAEZ LANCELOTTI TE; BOARELLI PV; FORNÉS MW

Mendoza

Jornada; Segundo encuentro de investigadores de la RADU; 2014

Un desarrollo adecuado de la motilidad espermática necesita de un correcto ensamble de las estructuras flagelares en el testículo y una eficiente maduración del espermatozoides durante el tránsito por el epidídimo. Entre los cambios madurativos que ocurren en el epidídimo, nos centraremos en los cambios redox que sufren las cisteínas de proteínas flagelares. Cabe destacar que la oxidación de las cisteínas es un evento relacionado con el inicio de la motilidad. Nuestro objetivo es determinar si el estado tiol de las proteínas flagelares es relevante para una correcta movilidad espermática. Para ello se utilizó a monobromobimane (mBBr) como un marcador fluorescente y bloqueador específico de sulfhidrilos. Resultados previos indican que durante el tránsito epididimario los tioles flagelares de espermatozoides de rata se modifican oxidándose a puentes disulfuro, perdiendo afinidad por mBBr. Por otro lado, cuando mBBr se une a las cisteínas disponibles los espermatozoides pierden la capacidad de moverse. Cuando estos ensayos se realizaron en espermatozoides humanos, también se determinó que mBBr afecta la movilidad de estas células. Además, con técnicas de microscopía confocal y western blot, determinamos que una de las proteínas afines a mBBr es ODF1. Finalmente por microscopía de fluorescencia se semicuantificó la afinidad por mBBr de proteínas flagelares de espermatozoides normozoospérmicos y astenozoospérmicos. Aquellas muestras de pacientes astenozoospérmicos se observó una mayor afinidad de las proteínas flagelares por mBBr comparado con espermatozoides normozoopermicos. Este trabajo demuestra que cuando los sulfhidrilos son bloqueados por mBBr se afecta la motilidad progresiva cambiando a curvilínea. También se determinó que una de las proteínas afines a mBBr es ODF1. Esta proteína está ampliamente relacionada con el proceso de motilidad espermática, pero es desconocido el mecanismo por el cual es regulada la motilidad. Finalmente, la diferencia en la afinidad por mBBr entre muestras normales con respecto a aquellas que no poseen una correcta motilidad, puede ser explicada por una incorrecta oxidación epididimaria de las cisteínas flagelares