La Presencia de Galectinas en la vacuola de Coxiella burnetii sugiere un daño de la membrana de dicho compartimiento

MANSILLA ME; COLOMBO MI

Ciudad Autónoma de Buenos Aires

Congreso; XIII Congreso Argentino de Microbiología 2013; 2013

Asociación Argentina de Microbiología

Coxiella burnetii, bacteria de la familia de las Rickettsias, es el agente etiológico de la fiebre Q. Este patógeno intracelular obligado tiene la capacidad de replicar en una vacuola con pH acídico que contiene enzimas lisosomales, o sea con características de fagolisosoma. Resultados obtenidos en nuestro laboratorio evidencian que Coxiella transita a través de la vía autofágica y que la inducción de autofagia favorece la infección y replicación de C. burnetii. La autofagia es un mecanismo de defensa contra bacterias mediante un proceso de reconocimiento de señales de patógenos o señales de daño. En trabajos recientes se ha demostrado que una población de Salmonella entérica es capaz de dañar la membrana del fagosoma que la contiene y es atrapada por la autofagia. Se sabe que las galectinas son proteínas que se unen a residuos de N-acetillactosamina, los cuales se ven expuestos cuando se dañan las membranas de compartimientos endo-fagosomales. Se ha demostrado que el reclutamiento de NDP52 (proteína adaptadora de la autofagia que une a LC3) depende de la presencia de Galectina-8 (Gal-8) y que en células que carecen de Gal-8 o NDP52 aumenta la proliferación de Salmonella por lo que se ha propuesto que Gal-8 podría ser una señal de inducción de autofagia y un factor antibacterial a tiempos tempranos de infección. También se ha demostrado que Gal-3 se acumula en la membrana dañada de vesículas que contienen bacterias como Shigella y Listeria. En el presente trabajo se  analizó el reclutamiento de galectinas al fagosoma o a la vacuola de Coxiella a distintos tiempos de infección. Se determinó que todas las galectinas evaluadas (Gal-3, Gal-8, Gal-9, Gal-1, Gal-4), con excepción de Gal-10, se asocian a la vacuola replicativa de C. burnetii aunque dicho reclutamiento ocurre a distintos tiempos posinfección. También se evaluó el reclutamiento de la proteína adaptadora de la autofagia NDP52 a la vacuola de C. burnetii, observándose la presencia de dicha proteína a distintos tiempos posinfección así como la colocalización de la misma con Gal-8 y LC3 en el fagosoma de C. burnetii. Ensayos con Lysotracker, marcador de compartimientos acídicos,  indican que la vacuola de 48 hs de C. burnetii tiene características acídicas en lo que parecerían ser compartimentos vesiculares presentes en el interior de la vacuola replicativa. Dado que las galectinas se unirían a residuos de carbohidratos que serían expuestos cuando las membranas son dañadas, nuestros resultados sugieren que la membrana de la vacuola de Coxiella podría ser dañada afectándose el pH intravacuolar, lo cual explicaría la supervivencia de este patógeno en un ambiente que inicialmente es acídico/lisosomal.