IHEM   20887
INSTITUTO DE HISTOLOGIA Y EMBRIOLOGIA DE MENDOZA DR. MARIO H. BURGOS
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
LA LACTONA SESQUITERPÉNICA DESHIDROLEUCODINA, DESENCADENA SENESCENCIA Y APOPTOSIS EN LA MISMA CÉLULA
Autor/es:
LÓPEZ, LUIS A; COSTANTINO, V VALERIA; FERNÁNDEZ, DARÍO
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; LVIII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2013
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Investigación Clínica
Resumen:
Deshidroleucodina (DhL) es una lactona sesquiterpénica del grupo de los guainolidos que promueve la acumulación de marcadores de daño al DNA en células HeLa y desencadena el ingreso de las células al estado de senescencia o apoptosis según la concentración de DhL utilizada. Nos preguntamos si DhL puede producir en la misma célula senescencia y luego apoptosis. Células HeLa se trataron con 20 μM DhL (concentración que genera senescencia) y posteriormente con 30 μM DhL (concentración que produce apoptosis). Se analizaron en la misma célula la presencia de signos de senescencia y apoptosis. Actividad de la enzima SA-beta-Gal con el substrato X-Gal (indica senescencia) y reacción de Anexina V-FITC (indica apoptosis). Los experimentos se repitieron 3 veces y los resultados, media ± SE, se compararon por análisis de la varianza. Las células incubadas con DMSO (vehículo) por 48 y 72 h, presentaron senescencia en el 20 ± 2 y 21 ± 3% respectivamente y apoptosis en el 4 ± 0,2 y 3 ± 0,5% respectivamente. El porcentaje de células que presentaron los dos marcadores fue de 0,1 ± 0,01 (a) (48 h) y 0,05 ± 0,06 (b)% (72 h). 20 μM DhL por 48 y 72 h produjo senescencia en el 45 ± 5 y 55± 4% de las células respectivamente y apoptosis en el 4 ± 1 y 6± 2% de las células respectivamente. Se observó que el 0,2 ± 0,1 (c) (48 h) y el 0,1 ± 0,3 (d) (72 h)% de las células presentaban los dos marcadores (para senescencia y apoptosis). El tratamiento con 30 μM DhL por 24 h a células que habían sido incubadas previamente con 20 μM DhL por 48 horas, produjo apoptosis en el 83 ± 6% de las células. Se determinó que el 42 ± 2 (e)% de las células en apoptosis presentaron la marcación para senescencia. Análisis estadístico entre los grupos: Sin diferencia significativa entre (a) vs (c) y (b) vs (d). Diferencia significativa de (c) vs (e) p ≤ 0,001. Se interpreta que DhL desencadena senescencia y luego apoptosis en la misma célula.