La maquinaria de transporte de catepsina D en células de tumores mamarios y su posible regulación hormonal.

BANNOUD N; VARGAS-ROIG L; RUSSO M; SOSA MA

Congreso; LVIII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC).; 2013

Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC)

Las células tumorales secretan proteinasas (catepsinas), involucradas en la invasión y metástasis tumoral. Estas enzimas son comúnmente transportadas a lisosomas por receptores a manosa-6-P (MPRs), sortilina o vías alternativas. Se han descripto dos formas de MPR: catión-dependiente (CD-MPR) y catión-independiente (CI-MPR), El CD-MPR participaría en la exocitosis de enzimas lisosomales. En algunos tipos celulares, la pro-catepsina D (pCatD)(precursor de catepsina D,CatD), interactúa con prosaposina (PSAP) y ambas son distribuidas intracelularmente por el receptor sortilina (Sort). En células de tumores mamarios malignos se observó un incremento en la secreción de pCatD, aunque aún no se conoce su mecanismo. Algunos lo atribuyen a un defecto en la acidificación de compartimientos, y otros a una regulación negativa del CI-MPR inducida por estradiol (EST). Hemos propuesto elucidar el mecanismo de secreción de catepsinas en células tumorales mamarias y su probable regulación hormonal. En una primera etapa estudiamos la expresión de CatD, CD-MPR y Sort en dos líneas celulares (MCF-7 y MDA-MB 231, con y sin receptores a EST respectivamente), en presencia o ausencia de 17β-EST y/o tamoxifeno (TX), y en presencia o ausencia de NH4Cl. La expresión de las proteínas fue estudiada por inmunoblot en homogenatos celulares. Observamos que la expresión de CatD y CD-MPR es mayor en las células MCF-7. A su vez, EST incrementó la expresión de CatD y CD-MPR en estas células, y este efecto fue revertido por TX. La hormona no influyó en la expresión de Sort. El tratamiento con NH4Cl disminuyó el nivel intracelular de CatD y aumentó el de pCatD. Estos resultados sugieren que: la expresión de CatD y CD-MPR son influenciadas por EST, lo que justifica las diferencias entre las 2 líneas celulares; el receptor Sort podría ser uno de los mecanismos de transporte de proCatD en estas células; y la mayor expresión y secreción de proCatD no se debería a fallas en el proceso de acidificación.